可溶性CD40配體對THP-1細胞株增殖及Bcl-2、P53 mRNA表達的影響.pdf

1、目的:探討可溶性CD40配體(sCD40L)對人急性單核細胞白血病THP-1細胞株增殖、凋亡以及凋亡相關(guān)基因BCL-2、P53 mRNA表達的影響。
　　方法:(1)采用CCK-8法檢測不同濃度sCD40L對急性單核細胞白血病 THP-1細胞株體外增殖的影響,確定最佳干預(yù)濃度;(2)采用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡;(3)通過實時熒光定量PCR法檢測sCD40L對THP-1細胞BCL-2、P53mRNA表達

2、的影響。
　　結(jié)果:(1)不同濃度sCD40L對THP-1細胞作用24h、48h、72h小時后均有不同程度的抑制的作用,與細胞對照組相比較,均有顯著差異(p<0.05),其中濃度為4μg/ml對急性單核細胞白血病 THP-1細胞抑制作用最明顯;同一濃度、不同作用時間下,72h抑制作用最明顯。(2)AnnexinV-FITC/PI雙染色顯示,THP-1細胞與sCD40L組共育24h、48h、72h后,均見明顯凋亡,與THP-1細胞對

3、照組相比較有顯著差異(P<0.05)。同一濃度、不同時間下,在72h時對THP-1細胞凋亡最明顯;(3)實時熒光定量PCR測定結(jié)果顯示:在同一時間內(nèi)sCD40L4.00μg/ml組與細胞對照組相比較,Bcl-2mRNA的表達量明顯下調(diào),而P53 mRNA的表達明顯上調(diào),且與細胞對照組相比較均有顯著差異(P﹤0.05);在不同時間內(nèi),兩種基因的表達量與時間有相關(guān)性。
　　結(jié)論:(1) sCD40L在體外能夠抑制THP-1細胞增殖,誘