載銀納米復(fù)合物在體外抗菌性的研究.pdf

1、研究背景:
　　 生物材料植入人體后最嚴(yán)重的并發(fā)癥是感染，一旦發(fā)生會(huì)導(dǎo)致治療的失敗其結(jié)局是毀滅性的。感染對(duì)生物材料植入后有其自身的特點(diǎn)及發(fā)病原理，原理為在生物材料的表面形成物細(xì)菌生物膜[1]。在有生命或無生命物體的表面有著細(xì)菌附著，其細(xì)菌自身分泌具有高度的組織化并有多細(xì)胞群體結(jié)構(gòu)并含有胞外黏質(zhì)物的群體結(jié)構(gòu)稱為細(xì)菌生物膜。在其內(nèi)部的細(xì)菌具有抵抗外部入侵和避免抗生素治療的作用，細(xì)菌生物膜是導(dǎo)致生物材料植入感染難以控制的根源，細(xì)菌生物

2、膜是與浮游的體外細(xì)胞所形成環(huán)境的相對(duì)的存在形式，其構(gòu)成是由細(xì)菌和胞外多聚物[2]。細(xì)菌的生長方式是具有保護(hù)性的其可含有其高強(qiáng)度的組織化多為的細(xì)胞改變結(jié)構(gòu)其性能就是附貼在樣本生物置入材料的表面。樣本表面形成的細(xì)菌生物膜生物膜其結(jié)構(gòu)和功能特點(diǎn)是:細(xì)菌附著在支持物表面存在粘附定植方式很有利還增加了耐藥和毒理基因的傳遞，還有更有利于對(duì)抗宿主抗菌藥物和免疫細(xì)胞及免疫分子的攻擊相比與單個(gè)或混懸的菌細(xì)胞，同時(shí)還。其難以被消除的根本原因就是這些結(jié)構(gòu)和功

3、能特點(diǎn)。
　　 現(xiàn)在國內(nèi)與國對(duì)于生物膜的預(yù)防及抑制無有效作用，生物膜的治療現(xiàn)在有很多都未有滿意的臨床療效，現(xiàn)在有是“聲裂法、酶處理法、超聲波法、渦流法、電刺激法等等”。某些植入物的更換也無效有的對(duì)浮游細(xì)菌的的耐藥菌株也沒有作用，且有可能會(huì)引起耐藥菌株的感染。納米銀是優(yōu)秀的抗菌涂層材料具有活性強(qiáng)菌譜廣的特點(diǎn)，制作出無菌涂層將抗菌材料應(yīng)用于生物材料植入物表面提供了新的可行性思路[3]。
　　 第一部分:
　　 載銀納

4、米復(fù)合物涂層的準(zhǔn)備
　　 目的:
　　 制備出含納米銀的抗菌涂層。檢測(cè)載銀納米復(fù)合物的特征。
　　 方法:按質(zhì)量比為1∶20的比例將粉末狀的平均粒直為10μm羥基磷灰石和5μm銀粉進(jìn)行備料。充分并且均勻分散兩種粉末，使其兩種粉末在QM—3SP2型上海（行星式）球磨機(jī)充分?jǐn)嚢杌旌?0分鐘。應(yīng)用在HK型的恒溫水浴鍋將混合的粉末通過電泳沉積到鈦基體上。檢測(cè)涂層成份和表征應(yīng)用S-736型掃描電子顯微鏡、Magnna-IR

5、550型紅外光譜儀和PC型X射線衍射儀。
　　 結(jié)果:
　　 表明粒徑平均為100nm左右的納米銀顆粒可以均勻的分散的和羥基磷灰石粉末充分混合通過經(jīng)SEM、FTIR和XRD的分析，
　　 結(jié)論:
　　 通過化學(xué)共沉淀法和機(jī)械球磨的方法成功將納米銀顆粒載入羥基磷灰石涂層。
　　 第二部分:
　　 載銀納米復(fù)合物涂層在體外對(duì)生物膜形成的作用及原理
　　 目的:
　　 檢測(cè)表皮葡

6、萄球菌在生物膜形態(tài)及粘附的量，通過納米銀載入植入物表面后對(duì)表皮葡萄球菌生物膜形成的影響。
　　 方法:
　　 1.實(shí)驗(yàn)菌株為購買的陽性表皮葡萄球菌。在類似人體環(huán)境的37℃環(huán)境下將無菌的載銀納米復(fù)合物涂層的樣本及無菌的不含銀的復(fù)合物體分別放入到1.0(×)107CFU/ml10ml菌液中進(jìn)行培養(yǎng)。分別在6，24，48，72小時(shí)對(duì)培養(yǎng)的載銀納米復(fù)合物的樣本及不含銀的復(fù)合物體的表面生物膜通過激光掃描共聚焦顯微鏡對(duì)其生物膜進(jìn)行形

7、態(tài)學(xué)觀察及表面生物膜的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)并對(duì)照。2.將制備好的樣品復(fù)合物涂層放入胎牛血清中用ICP-NS(英國Agiilent公司)來檢測(cè)并測(cè)試其釋放的速率，同時(shí)將樣品同樣的方法放置在空氣中12周后重新進(jìn)行進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)測(cè)量表皮葡萄球菌粘附分子的atle的表達(dá)
　　 結(jié)果:
　　 不含銀的復(fù)合物體在12小時(shí)左右已經(jīng)出現(xiàn)了成熟的表皮葡萄球菌生物膜，載銀納米復(fù)合物表面48小之后才出現(xiàn)表皮葡萄球菌生物膜，同時(shí)將載銀納米涂層與羥基磷石