馬拉色菌在花斑癬色素改變中所起作用的研究.pdf

1、本文分三部分研究了馬拉色菌在花斑癬色素改變中所起作用。 第一部分：針對傳統(tǒng)吐溫試驗(yàn)中的一些不足之處，摸索一種新型的吐溫試驗(yàn)方法，以提高馬拉色菌菌種鑒定的準(zhǔn)確性。 方法：制作不同濃度梯度的吐溫平板，將馬拉色菌菌懸液滴加其上，37℃培養(yǎng)5天，對菌落孢子進(jìn)行計數(shù)，通過方差分析，獲得較適于馬拉色菌生長的4種吐溫(20、40、60和80)的濃度。利用7種馬拉色菌標(biāo)準(zhǔn)株驗(yàn)證新型的吐溫培養(yǎng)基。 結(jié)果：4種吐溫最適于馬拉色菌生長

2、的濃度為2％。新型吐溫培養(yǎng)基在對7種標(biāo)準(zhǔn)株的鑒定中得到了良好的驗(yàn)證。 結(jié)論：新型吐溫培養(yǎng)基顯著提高了馬拉色菌菌種鑒定的準(zhǔn)確性，同時也提高了馬拉色菌鑒定的效率和經(jīng)濟(jì)性。 第二部分：觀察引起不同臨床色素表現(xiàn)的馬拉色菌與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)液對B16F10黑素瘤細(xì)胞黑素合成的影響。 方法：MTT法篩選不同比例的馬拉色菌對角質(zhì)形成細(xì)胞增殖率的影響；不同組共培養(yǎng)液培養(yǎng)B16F10細(xì)胞6天后，測定B16F10細(xì)胞增殖率、黑素含

3、量、酪氨酸酶活性和酪氨酸酶蛋白表達(dá)。 結(jié)果：角質(zhì)形成細(xì)胞與馬拉色菌在1：10比例以下，角質(zhì)形成細(xì)胞的生長狀況不受馬拉色菌的影響(P>0.05)。當(dāng)比例提高至1：20以上時，角質(zhì)形成細(xì)胞的生長受到顯著抑制(P<0.01)。色沉區(qū)馬拉色菌與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)液引起B(yǎng)16F10細(xì)胞黑素含量、酪氨酸酶活性和酪氨酸酶蛋白表達(dá)增加(.P<0.01)，細(xì)胞增殖率無明顯變化(P>0.05)。色減區(qū)馬拉色菌共培養(yǎng)液的作用與之相反。 結(jié)論：

4、馬拉色菌通過與角質(zhì)形成細(xì)胞相互作用，影響B(tài)16F10細(xì)胞酪氨酸酶的活性和表達(dá)，調(diào)節(jié)黑素合成。不同色素異常皮損來源的菌株其影響效果截然不同。 第三部分：探討引起花斑癬不同臨床色素表現(xiàn)的馬拉色菌與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)，導(dǎo)致與黑素合成相關(guān)的細(xì)胞因子的變化。 方法：采用色沉和色減區(qū)分離的馬拉色菌與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)，在不同時間段，收集上清液，E12SA法測定堿性成纖維細(xì)胞因子(b-FGF)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、神經(jīng)生長因子-β

5、(NGF-B)、白介素-1a(IL-la)、白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)和干細(xì)胞因子(SCF)的動態(tài)變化。 結(jié)果：馬拉色菌刺激角質(zhì)形成細(xì)胞分泌IL-1a、IL-6、TNF-a、ET-I增加(P<0.01)。未檢測到b-FGF、NGF-β和SCF的產(chǎn)生(P>0.05)。色沉區(qū)馬拉色菌刺激產(chǎn)生的ET-1顯著高于色減區(qū)馬拉色菌(P<0.01)。 結(jié)論：不同馬拉色菌刺激角質(zhì)形成細(xì)胞分泌黑素合成相關(guān)因子的