聯(lián)合應用骨髓間充質干細胞與pLXSN-bcl-2基因治療大鼠缺血性腦損傷療效的研究.pdf

1、缺血性腦血管病的發(fā)病率和病死率逐年增加，并呈年輕化趨勢，已經(jīng)越來越嚴重的威脅到人類健康和生活，因此，缺血性腦血管病有效的治療方法一直是人們研究的重要課題。 骨髓間充質干細胞(MSC)是目前缺血性腦血管病治療研究的熱點， MSC的治療效果已經(jīng)從多方面得到證實。但是，MSC移植入腦后所面臨的一個重要問題就是細胞凋亡，如何減少MSC的自身凋亡，更大限度的發(fā)揮它的作用需要進一步探討。本研究將MSC與已經(jīng)明確具有抗凋亡作用的bcl-2基因

2、聯(lián)合應用大鼠腦缺血模型，通過觀察大鼠的神經(jīng)功能評分、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)表達情況、腦內(nèi)細胞凋亡情況等指標，探討這兩種因素的聯(lián)合應用是否對缺血性腦血管病的有更好的治療效果及其作用機制。 實驗材料與方法： 將40只Wistar大鼠制作為大腦中動脈缺血(MCAo)模型，隨機分為空白對照組、單純MSC組、單純bcl-2基因組和實驗組(MSC+bcl-2組)，分別于造模后3小時和24小時經(jīng)頸動脈和尾靜脈注入質粒pLXSN

3、攜帶的bcl-2基因和BrdU標記的MSC，觀察大鼠的神經(jīng)功能評分；每組大鼠又分為3天、14天兩個時間點處死(每個時間點5只)，斷頭取腦，免疫組化法觀測腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達情況、Bcl-2蛋白表達水平、BrdU標記的MSC在腦內(nèi)的分布及數(shù)量，TUNEL法檢測腦內(nèi)細胞凋亡情況。 每個標本取兩張切片，在光學顯微鏡下隨機于梗死側梗死灶邊緣、海馬及紋狀體區(qū)計數(shù)5個高倍視野(HPF，×400)，顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖像。全部資料采用SP