肝纖維化過(guò)程中內(nèi)毒素對(duì)CTGF表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]觀察肝纖維化過(guò)程中結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)的細(xì)胞來(lái)源、表達(dá)；探討肝纖維化過(guò)程中大鼠血漿內(nèi)毒素含量的變化與CTGF表達(dá)的相關(guān)性，為進(jìn)一步揭示肝纖維性疾病發(fā)生的機(jī)制及肝纖維化的臨床防治提供實(shí)驗(yàn)性理論依據(jù)。 [方法]采用CCl4皮下注射造模，37只體重相近(200g±20g)的雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為2組：正常對(duì)照組(5只)和實(shí)驗(yàn)組(32只)，實(shí)驗(yàn)組又被分為2周組、4周組、6周組、8周組(每組各8只)。各組動(dòng)物按設(shè)計(jì)于

2、實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，在乙醚麻醉，無(wú)菌無(wú)熱源條件下，腹主動(dòng)脈采血，組織取材。常規(guī)HE染色觀察肝臟病變；天狼猩紅膠原染色并進(jìn)行圖像分析、組織羥脯氨酸含量測(cè)定觀察肝纖維化程度；產(chǎn)色基質(zhì)偶氮法鱟試劑定量測(cè)定血漿內(nèi)毒素；免疫組化檢測(cè)α-SMA在肝臟的表達(dá)，觀察HSCs的活化情況；原位雜交檢測(cè)肝臟CTGFmRNA的細(xì)胞來(lái)源；Westen-blot檢測(cè)CTGF在肝臟的表達(dá)。 [結(jié)果]實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化過(guò)程中：1.血漿內(nèi)毒素含量梯度上升，組間相比差異顯

3、著。2.CCl4作用2周后，肝臟膠原纖維含量逐漸增多。3.正常對(duì)照組未檢測(cè)到CTGFmRNA表達(dá)，從CCl4作用2周開始直到8周時(shí)活化的HSCs、成肌纖維細(xì)胞均有較強(qiáng)的CTGFmRNA陽(yáng)性著色，但早期以散在的HSCs表達(dá)為主，后期匯管區(qū)，纖維間隔呈現(xiàn)較集中的陽(yáng)性分布；CCl4作用6周后部分血管內(nèi)皮細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞開始明顯表達(dá)CTGFmRNA；作用8周后部分增生膽管上皮細(xì)胞成為CTGFmRNA的另一主要來(lái)源。4.Weston-blot結(jié)果