越橘離體培養(yǎng)倍性育種研究.pdf

1、本試驗(yàn)對(duì)越橘花藥愈傷組織的誘導(dǎo)方法和適宜的生長(zhǎng)條件進(jìn)行細(xì)致的摸索和研究，試驗(yàn)以越橘六個(gè)品種的花藥為試材進(jìn)行離體培養(yǎng)體系的研究，著重研究了越橘花藥離體培養(yǎng)中誘導(dǎo)愈傷組織脫分化過程中各因素對(duì)花藥愈傷組織形成的影響作用以及花藥愈傷組織再分化過程中增殖及分化的最佳培養(yǎng)基配方；同時(shí)也對(duì)秋水仙素誘導(dǎo)越橘組培苗莖段和已誘變植株倍性的純化進(jìn)行研究。其研究結(jié)果具體如下： 1、在越橘花藥愈傷組織脫分化過程中，環(huán)境條件對(duì)花藥愈傷組織的形成起到重要作用

2、，在研究光照對(duì)越橘花藥愈傷組織形成中，黑暗條件下有助于越橘花藥愈傷的產(chǎn)生，其花藥愈傷組織誘導(dǎo)率可達(dá)53.33％；不同低溫處理時(shí)間對(duì)越橘花藥愈傷組織誘導(dǎo)的作用不是十分明顯，其中不經(jīng)過低溫處理和進(jìn)行4℃低溫處理1天有利于越橘花藥愈傷組織的誘導(dǎo)，其誘導(dǎo)率最高可達(dá)80.13％。而不同的取材時(shí)間對(duì)越橘花藥愈傷組織的形成也有影響：花朵采集應(yīng)在盛花期，越橘宜在其進(jìn)入花期一周左右為最佳采集時(shí)期；采集花冠的長(zhǎng)寬比為2:1的花朵為最佳試材。 2、在

3、越橘花藥愈傷組織再分化過程中，對(duì)誘導(dǎo)激素的種類和配比進(jìn)行進(jìn)一步的研究，研究結(jié)果表明：WPM+6-BA0.5mg/L+2，4-D1.0 mg/L為最佳的培養(yǎng)基配方，其花藥愈傷組織增殖量可達(dá)1.6567g；在越橘花藥愈傷組織誘導(dǎo)過程中，2，4-D起著主導(dǎo)作用，在配以相同濃度不同的細(xì)胞分裂素后，其中CPPU對(duì)越橘花藥愈傷組織的增殖量影響較大，但使用CPPU花藥愈傷組織的長(zhǎng)勢(shì)狀況不如6-BA和KT混合使用和6-BA單獨(dú)使用的效果好。同時(shí)對(duì)培養(yǎng)基

4、的pH值進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：pH值為5.50時(shí)對(duì)越橘花藥愈傷組織的增殖有明顯的作用，增殖量可達(dá)1.7885g；當(dāng)pH值低于5.0時(shí)有利于愈傷組織的長(zhǎng)勢(shì)，愈傷組織結(jié)構(gòu)致密。在越橘花藥愈傷組織增殖的研究中，以WPM+CTK1.0mg/L+IBA0.4mg/L和WPM+6-BA0.5mg/L+NAA0.25mg/L為最佳的增殖培養(yǎng)基配方，最有利于越橘花藥愈傷組織的增殖與分化。 3、利用秋水仙素對(duì)越橘兩個(gè)品種進(jìn)行誘導(dǎo)多倍體研究并進(jìn)行倍

5、性鑒定，結(jié)果表明： 莖段培養(yǎng)：“北陸”經(jīng)過秋水仙素浸漬法和藥劑培養(yǎng)基法處理后，能誘導(dǎo)出嵌合體的變異植株，浸漬法最好的組合是濃度為2.0mg/L的條件下處理24h，變異率最高達(dá)到32.50％；藥劑培養(yǎng)基法最好的處理方法是濃度為0.002％，變異率達(dá)到5％，對(duì)已誘變的“埃利奧特”同時(shí)也進(jìn)行秋水仙素浸漬法和藥劑培養(yǎng)基法處理，和“北陸”效果基本一致，也出現(xiàn)了四倍體變異細(xì)胞，但未見其他倍性細(xì)胞出現(xiàn)，可見加倍后的細(xì)胞可以通過多次繼代消失。