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1、本研究應(yīng)用質(zhì)粒提取、細(xì)菌培養(yǎng)、PCR、酶連免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、放射免疫測(cè)定(RIA)等技術(shù),利用本實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的以減毒沙門(mén)氏菌(CSO22)呈遞的pGM-CSF/SS基因疫苗,口服免疫45只5周齡雌鼠,以空菌和PBS作為對(duì)照,研究生長(zhǎng)抑素對(duì)生長(zhǎng)和繁殖機(jī)能的影響及其生物學(xué)安全性。主要包括以下內(nèi)容: 1.基因免疫對(duì)母鼠的促生長(zhǎng)效果 在初次免疫后2周、加強(qiáng)免疫后2周和4周,疫苗免疫組母鼠增重同空菌組和PBS對(duì)照組的增重相
2、比差異顯著(P<0.05);空菌組的增重高于PBS對(duì)照組,但差異不顯著(P>0.05)。這些結(jié)果顯示,SS疫苗免疫后對(duì)母鼠具有良好的促生長(zhǎng)效果。 2.基因免疫對(duì)生長(zhǎng)抑素抗體的影響 基因疫苗免疫組在初次免疫后2周、加強(qiáng)免疫后2周和4周、母鼠分娩當(dāng)天,血中抗體水平均顯著高于空菌組和PBS對(duì)照組(P<0.05),特別是在加強(qiáng)免疫第4周,血中抗體水平與對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.001),但哺乳3周后,疫苗處理組與對(duì)照組差異不
3、顯著(P>0.05)。在SS基因免疫組,抗體水平一開(kāi)始呈現(xiàn)逐步上升的趨勢(shì),到加強(qiáng)免疫后4周出現(xiàn)高峰,但分娩后抗體水平又逐漸下降,到哺乳3周后和對(duì)照組差異不顯著(p>0.05)。pGM-CSF/SS基因疫苗免疫可引起較高的體液免疫反應(yīng),但抗體持續(xù)時(shí)間有一定限度。 3.基因免疫對(duì)母鼠繁殖機(jī)能的影響 基因免疫后,對(duì)母鼠的發(fā)情周期、窩產(chǎn)仔數(shù)、窩重和初生重等繁殖指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示基因免疫組的發(fā)情周期比同空菌組和PBS對(duì)照組顯著
4、縮短(P<0.05),說(shuō)明生長(zhǎng)抑素疫苗免疫影響母鼠的發(fā)情。窩產(chǎn)仔數(shù)、窩重和初生重結(jié)果顯示,疫苗組同空菌組和PBS對(duì)照組相比,差異不顯著(P>0.05),但試驗(yàn)組仔鼠的初生重高于空菌組和PBS對(duì)照組。這些結(jié)果說(shuō)明,疫苗免疫可縮短母鼠的發(fā)情周期,但對(duì)窩產(chǎn)仔數(shù)、窩重、初生重沒(méi)有影響。 測(cè)定血中雌激素和孕激素水平顯示,在分娩當(dāng)天,基因免疫組雌激素水平顯著高于空菌組和PBS對(duì)照組(P<0.05),而在分娩后3周,各組雌激素都有所下降,但各
5、組差異不顯著(P>0.05);同樣,但產(chǎn)后和哺乳3周時(shí)孕激素水平各組差異不顯著。這些結(jié)果表明,SS疫苗免疫對(duì)雌激素分泌有促進(jìn)作用,但對(duì)孕激素分泌無(wú)影響。 4.基因免疫對(duì)仔鼠生長(zhǎng)發(fā)育的影響 哺乳期仔鼠增重結(jié)果顯示,在產(chǎn)后1周和2周,實(shí)驗(yàn)組的增重顯著高于空菌組和PBS對(duì)照組(P<0.05),但在哺乳末期,其增重差異不顯著(P>0.05)。哺乳期過(guò)后,基因免疫組和空菌組、PBS對(duì)照組相比,雖各周增重有所提高,但差異不顯著(P>
6、0.05);哺乳期后,同其它兩組相比,基因免疫組的增重效果不顯著(P>0.05)。 仔鼠生后第3、6、9周,基因免疫組同空菌組和PBS對(duì)照組相比,抗體水平和生長(zhǎng)激素水平有所提高,但差異不顯著(P>0.05),結(jié)果同增重效果相吻合。這些結(jié)果說(shuō)明,SS疫苗對(duì)母鼠的泌乳性能有一定改善,但哺乳期后,促生長(zhǎng)效應(yīng)不明顯。 5.基因疫苗的生殖毒性和基因整合研究 母鼠窩產(chǎn)仔數(shù)、窩重、仔鼠初重、雌雄比例、子代畸形率和死亡率、母鼠和
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