99mTc-MIBI、18F-FDG及18F-FLT攝取率變化早期評價耐藥人乳腺癌細胞化療療效的實驗研究.pdf

1、第一部分，99mTc-MIBI攝取率變化早期評價耐藥人乳腺癌細胞化療療效的實驗研究
　　目的：建立人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol體外攝取99mTc-MIBI實驗的方法學，觀察不同濃度5-FU作用人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol后99mTc-MIBI攝取的變化，分析其與細胞增殖間的關系，評估其用于早期評價乳腺癌化療反應的可行性。
　　方法：測定人乳腺癌細胞株MCF-7在不同實驗

2、條件下99mTc-MIBI攝取率：細胞數量1.25×105~2.5×106/孔，孵育時間20~120min，99mTc-MIBI的放射性活度1.85~29.6KBq，葡萄糖濃度0~11.1mmol/L。選取合適的實驗條件。測定人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用不同時間（24h、48h、72h）99mTc-MIBI攝取情況，并分別計算各自的細

3、胞攝取抑制率（△MIBI）=(對照組細胞攝取率－實驗組細胞攝取率)/對照組細胞攝取率。用MTT法檢測各組細胞的生長抑制情況。單因素方差分析及相關分析判斷99mTc-MIBI攝取抑制率與細胞增殖之間的關系。
　　結果：人乳腺癌細胞株MCF-7對99mTc-MIBI攝取在一定范圍內與細胞數量、孵育時間、葡萄糖濃度有關，與放射性活度無關。細胞數為1×106/孔，孵育時間100min，葡萄糖濃度0mmol/L，99mTc-MIBI放射性活

4、度3.7KBq時，MCF-7細胞99mTc-MIBI攝取率可達到（21.58±1.37）%，明顯高于其耐藥株MCF-7/Taxol。不同濃度5-FU作用后，人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的99mTc-MIBI攝取與細胞增殖均受到不同程度的影響，呈藥物濃度依賴性。（1）MCF-7細胞99mTc-MIBI攝取抑制率（△MIBI）在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（25.0

5、8±6.23）%、（32.02±5.84）%、（34.63±7.42）%、（34.70±2.64）%；48h分別為：（68.57±4.67）%、（77.06±8.95）%、（82.21±4.70）%、（83.27±4.10）%；72h分別為（77.32±1.79）%、（91.62±1.33）%、（93.01±1.62）%、（93.58±1.00）%；48h、72h組△MIBI與細胞增殖抑制率呈正相關，r、P值分別為（r=0.484, P

6、＜0.05）及（r=0.672, P＜0.01）。（2）MCF-7/Taxol細胞99mTc-MIBI攝取抑制率在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（23.43±2.93）%、（30.21±8.46）%、（30.23±8.58）%、（35.11±8.44）%；48h分別為：（38.11±4.93）%、（41.65±6.98）%、（42.37±1.02）%、（49.85±9.73）%；72h分別為

7、（46.18±1.93）%、（48.20±7.43）%、（49.21±1.79）%、（62.73±5.16）%；且48h組△MIBI與細胞增殖抑制率呈正相關，r、p值為（r=0.438, P＜0.05）。
　　結論：人乳腺癌細胞株MCF-7的99mTc-MIBI攝取率高于其耐藥株MCF-7/Taxol。99mTc-MIBI攝取率變化可以用來評估乳腺癌化療療效。
　　第二部分，18F-FDG攝取率變化早期評價耐藥人乳腺癌細胞化

8、療反應的實驗研究
　　目的：建立人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol體外攝取18F-FDG的實驗方法學，觀察不同濃度5-FU作用人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol后18F-FDG攝取率的變化，觀察其用于評價5-FU對MCF-7及MCF-7/Taxol細胞化療療效的價值。
　　方法：測定人乳腺癌細胞株MCF-7在不同實驗條件下18F-FDG攝取率：細胞數量1.25×105~2.5×10

9、6/孔，孵育時間20~120min，18F-FDG的放射性活度1.85~29.6KBq，葡萄糖濃度0~11.1mmol/L。選取合適的實驗條件。測定人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株 MCF-7/Taxol在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用不同時間（24h、48h、72h）18F-FDG攝取情況，并分別計算各自的細胞攝取抑制率（△FDG）=(對照組細胞攝取率－實驗組細胞攝取率)/對照組細胞攝取率

10、。采用流式細胞儀法檢測MCF-7細胞的凋亡情況，結合第一部分MTT結果，行單因素方差分析及相關分析，判斷18F-FDG攝取抑制率與細胞增殖之間的關系。
　　結果：人乳腺癌細胞株MCF-7對18F-FDG攝取在一定范圍內與細胞數量、孵育時間及葡萄糖濃度有關，與放射性活度無關。細胞數為1×106/孔，孵育時間100min，葡萄糖濃度0mmol/L，放射性活度3.7KBq時，MCF-7細胞18F-FDG攝取率可達到（41.26±0.86

11、）%，高于其耐藥株MCF-7/Taxol。不同濃度5-FU作用后，人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的18F-FDG攝取和細胞凋亡均受到不同程度的影響，呈藥物濃度依賴性。（1）MCF-7細胞18F-FDG攝取抑制率（△FDG）在5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（40.03±6.19）%、（48.05±7.57）%、（51.88±3.10）%、（55.69±2.69）%

12、；48h分別為：（76.21±4.05）%、（82.13±6.42）%、（87.33±2.47）%、（89.03±2.99）%；72h分別為（47.99±2.70）%、（49.20±0.78%、（51.44±1.13）%、（62.13±4.52）%；24h、48h、72h組△FDG與細胞增殖抑制率呈正相關，r、P值分別為（r=0.600, P＜0.01）、（r=0.841, P＜0.01）及（r=0.708, P＜0.01）。（2）MC

13、F-7/Taxol細胞18F-FDG攝取抑制率在5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（22.53±9.74）%、（40.75±3.44）%、（49.40±6.23）%、（64.58±5.52）%；48h分別為：（52.05±4.02）%、（78.81±2.50）%、（86.54±0.44）%、（87.26±1.23）%；72h分別為（16.23±3.50）%、（27.74±6.79）%、（47

14、.83±3.76）%、（53.78±6.52）%；48h、72h組△FDG與細胞增殖抑制率呈正相關，r、P值分別為（r=0.726, P＜0.01）及（r=0.586, P＜0.01）。
　　結論：5-FU作用后，人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的18F-FDG攝取均與MTT結果具有不同程度的相關性，48h時相關性極好。且與細胞早期凋亡相關。18F-FDG攝取變化可以早期評價5-FU對MCF-7及MCF-7

15、/Taxol細胞殺傷作用。
　　第三部分，18F-FLT攝取率變化早期評價人乳腺癌細胞化療療效的實驗研究
　　目的：建立人乳腺癌細胞株MCF-7體外攝取18F-FLT的方法學，探討18F-FLT攝取率變化評價5-FU對人乳腺癌細胞株MCF-7的化療療效的意義。
　　方法：測定人乳腺癌細胞株MCF-7在不同實驗條件下18F-FLT攝取率：孵育時間20~120min，18F-FLT的放射性活度1.85~29.6KBq，葡萄

16、糖濃度0~11.1mmol/L。選取合適的實驗條件。測定人乳腺癌細胞株 MCF-7在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h18F-FLT攝取的情況，并計算MCF-7細胞的攝取抑制率（△FLT）=(對照組細胞攝取率－實驗組細胞攝取率)/對照組細胞攝取率。
　　結果：人乳腺癌細胞株MCF-7對18F-FLT攝取在一定范圍內與孵育時間、葡萄糖濃度有關，與放射性活度無關。不同濃度5-FU作用24h

17、后，人乳腺癌細胞株MCF-7的18F-FLT攝取呈明顯的藥物濃度依賴性。（1）MCF-7細胞的18F-FLT攝取率在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為（20.35±1.38）%、（16.52±0.85）%、（12.68±0.21）%、（9.84±0.36）%、（8.87±1.14）%。（2）MCF-7細胞的18F-FLT攝取抑制率（△FLT）在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/m

18、L）作用24h分別為：（18.84±4.19）%、（37.69±1.03）%、（51.63±1.76）%、（56.43±5.63）%。
　　結論：人乳腺癌細胞株MCF-7的18F-FLT攝取與孵育時間、葡萄糖濃度有關，與放射性活度無關。18F-FLT攝取率變化在24h時就可以評價5-FU對MCF-7細胞化療的反應。
　　第四部分，99mTc-MIBI及18F-FDG攝取率變化早期評價耐藥人乳腺癌細胞化療療效的比較研究

19、　　目的：比較耐藥人乳腺癌細胞99mTc-MIBI及18F-FDG攝取率變化評估乳腺癌化療療效的差異。
　　方法：選取合適的實驗條件，測定人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用不同時間（24h、48h、72h）99mTc-MIBI及18F-FDG攝取情況，分別計算各自的細胞攝取抑制率（△MIBI/FDG）=(對照組細胞攝取率－實驗組細胞攝

20、取率)/對照組細胞攝取率。采用MTT法檢測各組細胞的生長抑制情況。通過單因素方差分析及相關分析判斷攝取抑制率與細胞增殖之間的關系，并進行比較分析。
　　結果：不同濃度5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h、48h、72h后，人乳腺癌細胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的攝取與細胞增殖均受到不同程度的影響。（1）MCF-7細胞在5-FU作用48h、72h時99mTc-MIBI攝取抑制率與細胞

21、增殖抑制率呈正相關，r、P值分別為（r=0.484, P＜0.05）及（r=0.672, P＜0.01）；MCF-7/Taxol細胞在5-FU作用48h時99mTc-MIBI攝取抑制率與細胞增殖抑制率呈正相關，r、p值為（r=0.438, P＜0.05）。（2）MCF-7細胞18F-FDG攝取抑制率與細胞增殖抑制率呈正相關，r、P值分別為（r=0.600, P＜0.01）、（r=0.841, P＜0.01）及（r=0.708, P＜0.