非小細(xì)胞肺癌中Wip1 mRNA的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、研究背景 肺癌是威脅人類健康最常見的惡性腫瘤之一。目前，有若干相關(guān)分子標(biāo)志物運(yùn)用于臨床，用于指導(dǎo)肺癌的診斷、治療與預(yù)后評價。但現(xiàn)有的證據(jù)還不足以解釋肺癌的發(fā)病原因，因此，從分子水平深入研究其癌變機(jī)理，尋找新的標(biāo)志基因具有重要意義。Wip1基因是PP2C家族成員之一，并證實為一種新的原癌基因。國外有學(xué)者研究顯示W(wǎng)ip1基因在人乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等腫瘤中高表達(dá)。其致癌機(jī)制是通過抑制p53基因功能而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。目前國內(nèi)外對Wi

2、p1基因與肺癌關(guān)系的研究尚未見報道，因此，我們運(yùn)用Real-time RT-PCR方法檢測Wip1基因在非小細(xì)胞肺癌患者中的表達(dá)情況。 目的 探討Wip1原癌基因在非小細(xì)胞肺癌發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中的作用及其表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系。 方法 1.收集44例新鮮非小細(xì)胞肺癌組織及相應(yīng)癌旁正常組織標(biāo)本，組織離體20分鐘內(nèi)置于液氮中，后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存。 2.采用Trizol法抽提組織總RNA，提取得

3、到的RNA采用M-MLV逆轉(zhuǎn)錄試劑盒逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。 3.以逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA為模板，Real-time RT-PCR檢測44例非小細(xì)胞肺癌組織及相應(yīng)癌旁正常組織Wip1 mRNA表達(dá)，并分析Wip1 mRNA表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。 結(jié)果 1.44例非小細(xì)胞肺癌及相應(yīng)癌旁正常組織均有Wip1 mRNA的表達(dá)，其中17例非小細(xì)胞肺癌中Wip1 mRNA相對表達(dá)量是相應(yīng)癌旁正常肺組織的2倍以

4、上，占38.6％。在非小細(xì)胞肺癌組織中的相對表達(dá)要高于癌旁正常肺組織，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Ratio=2.1644±1.394，p<0.05)。 2.Wip1 mRNA的表達(dá)量在不同腫瘤分級之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=5.08,p=0.013)。腫瘤細(xì)胞分化程度越低，Wip1 mRNA表達(dá)越高；腫瘤細(xì)胞分化程度越高，Wipl mRNA表達(dá)越低。非小細(xì)胞肺癌組織中，鱗癌與腺癌組織中Wip1 mRNA的表達(dá)量無明顯差別(t=0.68

5、7,p=0.503)；Wip1 mRNA的表達(dá)在不同臨床分期之間(F=0.349,p=0.79)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間(F=0.361，p=O．70)均無統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)論 1.Real-time RT-PCR方法具有敏感、特異、快速等特點，為Wip1 mRNA的檢測提供方法學(xué)依據(jù)。 2.Wip1基因是一個新發(fā)現(xiàn)的原癌基因，其在非小細(xì)胞肺癌高表達(dá)，可能與腫瘤發(fā)生有關(guān)，并可能成為NSCLC基因治療的新靶點。 3.