黃芪治療消渴病(糖尿病)的藥證文獻(xiàn)與有效成分研究.pdf

1、文章從文獻(xiàn)研究、文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)分析、有效成分分離、藥效學(xué)驗(yàn)證四個方面探求黃芪治療消渴病的用藥規(guī)律及有效成分，進(jìn)行了中藥文獻(xiàn)分析和現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究結(jié)合的初步嘗試，得到了系統(tǒng)的有關(guān)黃芪治療消渴病(糖尿病)的研究資料，為推進(jìn)黃芪降糖新藥單體及復(fù)方的研發(fā)提供了理論依據(jù)，為中醫(yī)文獻(xiàn)的研究提供了新的思路。
　　 第一章，運(yùn)用文獻(xiàn)學(xué)的方法，收集整理古代文獻(xiàn)，對歷代醫(yī)家關(guān)于消渴病及黃芪治療消渴病的論述進(jìn)行了全面總結(jié)和回顧.從文字學(xué)和文獻(xiàn)學(xué)角度進(jìn)行了消渴及

2、相關(guān)病名的釋義；從學(xué)術(shù)史發(fā)展的角度對消渴的病因進(jìn)行了總結(jié)；對各個時代有特色的消渴證治進(jìn)行了總結(jié)與匯總；分析了黃芪的藥性功效，整理了古醫(yī)籍中黃芪治療消渴類方的資料，即晉唐時黃芪多以治消渴虛勞小便數(shù)癥屬下消者，如參芪湯方；宋時黃芪治消渴的范圍擴(kuò)大至三消皆治，同時注重了用黃芪對消渴并發(fā)癰疽的治療；金元時則以朱丹溪的滋陰降火治則對黃芪組方影響最大，如地黃飲子，清心蓮子飲等；明清時代的竹葉黃芪湯方，為治消渴氣陰兩虛的傳統(tǒng)方劑；近代張錫純的滋膵飲方

3、，以黃芪配山藥、葛根生津止渴；現(xiàn)代醫(yī)家則多以黃芪、山藥、人參、生地等配伍.同時分析了黃芪治療消渴兼證的情況，在消渴兼癰疽，兼中風(fēng)，兼腎病，兼陽痿等方面黃芪都有很好的應(yīng)用。最后，探討了黃芪的炮制方法及生用、炙用對其功效的影響。從整體上認(rèn)識了消渴病的發(fā)展規(guī)律及黃芪在其中的重要地位，為以后的研究奠定了文獻(xiàn)基礎(chǔ)。
　　 第二章，建立了黃芪治療消渴病方藥數(shù)據(jù)庫，利用Excel和SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對其進(jìn)行頻數(shù)、因子、聚類等數(shù)理統(tǒng)計(jì)，分析黃芪治

4、療消渴病的證治規(guī)律和特點(diǎn)。黃芪治療消渴病的組方中，補(bǔ)虛藥為黃芪治療消渴的主要配伍藥物，其次是清熱藥，同時注重利水滲濕，安神收斂藥物的配伍；補(bǔ)虛藥中，以人參、甘草為代表的補(bǔ)氣藥為主；清熱藥中清熱瀉火藥使用頻次最多，但高頻清熱藥物是清虛熱的地骨皮；統(tǒng)計(jì)表明，宋代醫(yī)家在治療消渴時較多的應(yīng)用黃芪；黃芪的用量在唐時最大，元時最低，至明清則又漸增；黃芪治療消渴類方中，劑型隨癥而變，湯劑、丸劑、散劑均占據(jù)了較大的比重，煎服方法，豐富多變；方劑主治以三

5、消和腎元虧虛的下消為主；兼癥的治療方面，消渴兼虛勞，渴兼癰，渴兼小便不利為主要治療方面；方劑名稱中，以黃芪命名的方劑占了絕對優(yōu)勢；在組方配伍時，更注重腎經(jīng)藥物的選用，注重循經(jīng)導(dǎo)藥的作用，同時肝經(jīng)的藥物也多有選用；在配伍藥物的性味上以甘味為主，取其甘補(bǔ)之效。因子分析表明，黃芪治療消渴類方中，益氣養(yǎng)陰藥為主因子?？焖倬垲惙治霰砻髌湎嚓P(guān)連配伍藥為人參，茯苓，甘草，益氣養(yǎng)陰，淡滲利濕，治以脾腎俱損，氣陰兩虛，小便白濁如膏之消渴日久為主癥。統(tǒng)計(jì)中

6、發(fā)現(xiàn)許多至今已不常用之中藥，如土瓜根，羊腎，桑螵蛸等，一些藥物的特殊用法如生地黃絞汁服用等也值得進(jìn)一步研究，
　　 第三章對黃芪治療消渴病(糖尿病)的有效成分進(jìn)行了分離純化與結(jié)構(gòu)確證.在文獻(xiàn)綜述的基礎(chǔ)上確定了以黃芪多糖與黃芪皂甙兩種成分為研究對象，確定黃芪多糖的最優(yōu)化提取工藝為12倍量的蒸餾水浸泡，100℃沸水浴煮沸2h；加入無水乙醇至濃度70％，離心取沉淀，得黃芪粗多糖；用732樹脂靜態(tài)吸附除蛋白，二次醇沉，上DEAESeph

7、arose Fast Flow離子交換柱和Toyopear HW-75分子篩柱進(jìn)行層析，得黃芪多糖，定量分析方法為以葡聚糖為標(biāo)準(zhǔn)品的硫酸蒽酮法較好。運(yùn)用糖組成分析、紅外、紫外、氣相及高效液相色譜等方法研究多糖的理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)，證實(shí)該多糖為分子量約38萬道爾頓的中性多糖，分析表明其可能是一種新的黃芪多糖，其性質(zhì)易溶于水，不溶于高濃度的乙醇，丙酮等有機(jī)溶劑，與碘試劑反應(yīng)不顯藍(lán)色，不合硫酸基團(tuán)，非酸性多糖，不舍蛋白質(zhì)、核酸組分，也不合酚類色素

8、；水解后單糖是葡萄糖；紅外分析說明所得的黃芪多糖為α-葡聚糖。并得到黃芪皂甙的最佳提取工藝為，提取黃芪多糖后的醇沉上清液，減壓濃縮至干，過AB-8樹脂柱，收集富皂甙部分，減壓濃縮后真空干燥，得棕黃色黃芪皂甙，提取過程中以黃芪甲甙為對照品進(jìn)行了定量測定。該提取方法的優(yōu)點(diǎn)是可以同時提取到多糖和皂甙兩種有效成分，同時減少了有機(jī)溶劑的使用。
　　 第四章對提取的黃芪有效成分進(jìn)行了藥效學(xué)驗(yàn)證。對黃芪多糖作了四氧嘧啶小鼠(Ⅰ型糖尿病模型)與

9、kkay鼠(Ⅱ型糖尿病模型)的降糖效果驗(yàn)證。黃芪皂甙則作了體外(α-糖苷酶抑制作用)與體內(nèi)藥效學(xué)(四氧嘧啶模型小鼠)驗(yàn)證。結(jié)果表明黃芪多糖對正常小鼠的血糖水平無影響，對四氧嘧啶誘發(fā)高血糖有一定的預(yù)防作用，400mg/kg劑量組對四氧嘧啶模型小鼠有較好的降糖效果，有較好的抗氧化作用，對血脂的升高有較好的控制效果，能較好的控制四氧嘧啶小鼠的肝腎指數(shù)和體重，提高糖尿病小鼠的脾指數(shù)，提示黃芪多糖不僅有好的降糖效果，同時有一定預(yù)防糖尿病的作用，對

10、并發(fā)癥也有較好的治療作用，其降糖效果優(yōu)于對照藥參芪降糖沖劑.黃芪多糖對KKay小鼠降血糖作用的量效關(guān)系實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著給藥劑量的增加，降血糖作用逐漸增強(qiáng)，以400mg/kg劑量組降血糖作用較為明顯。黃芪多糖降血糖作用的時效關(guān)系表明，給藥后4h、8h、12h血糖明顯下降，以給藥后8h降血糖作用最為明顯，隨后血糖水平逐漸上升，給藥后24h恢復(fù)到給藥前水平。多次給藥結(jié)果說明黃芪多糖有降血糖作用，400mg/kg劑量組可使KKay小鼠血糖明顯

11、降低，并有一定的維持作用。黃芪皂甙的體外藥效學(xué)試驗(yàn)表明，黃芪皂甙對α-葡萄糖苷酶的活性的抑制作用隨著加入量的增加而顯著增加，當(dāng)加入1.5mg的時候，抑制率就達(dá)到了71.6％，遠(yuǎn)優(yōu)于對照藥阿卡波糖的抑制效果，當(dāng)黃芪皂甙增加到6mg時，其抑制效果可達(dá)到-96％，足證黃芪皂甙對α-葡萄糖苷酶的活性有著較強(qiáng)的抑制作用。提示黃芪皂甙的降糖作用機(jī)制中有可能是通過抑制酶活性來限制多糖降解，抑制單糖吸收從而降低血糖。體內(nèi)藥效學(xué)驗(yàn)證則通過對正常小鼠及四氧

12、嘧啶小鼠連續(xù)不同劑量的給藥，測定體重、血糖、糖耐量、甘油三酯、總膽固醇、氧自由基、肝、脾、腎指數(shù)等指標(biāo)，證實(shí)黃芪皂甙能降低正常小鼠血糖，對正常小鼠的糖耐量有明顯的改善。黃芪皂甙100mg/kg劑量能顯著的降低四氧嘧啶小鼠的血糖水平，說明黃芪皂甙對四氧嘧啶所引起的胰島β細(xì)胞的破壞有一定的改善作用.同時實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，黃芪皂甙能夠較好的維持小鼠的體重，提高脾指數(shù)，在某些方面優(yōu)于臨床常用的對照藥阿卡波糖，這些都提示黃芪皂甙有較好的降糖效果。通過藥