蛋白酶活化受體1在鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：檢測(cè)蛋白酶活化受體1(PAR1)在鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)，研究其在鼻咽癌細(xì)胞增殖、黏附和侵襲等惡性生物學(xué)行為中的作用。
　　 方法：選取5株有代表性的鼻咽癌細(xì)胞系，其中CNE1為高分化細(xì)胞系，CNE1-LMP1為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染潛伏膜蛋1(LMP1)基因的細(xì)胞系，其已被證實(shí)比CNE1細(xì)胞系更具侵襲性和轉(zhuǎn)移性，CNE2為低分化細(xì)胞系，SUNE1-5-8F為高成瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系，而SUNE1-6-10B為只成瘤不轉(zhuǎn)移細(xì)胞系，Real tim

2、e PCR和Western blot檢測(cè)5株鼻咽癌細(xì)胞系中PAR1 mRNA和蛋白的表達(dá)；細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)PAR1在鼻咽癌細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位；MTT、黏附實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)分別用來(lái)檢測(cè)PAR1特異性激動(dòng)肽SFLLRN和凝血酶對(duì)CNE1-LMP1細(xì)胞增殖、黏附和體外侵襲的影響；明膠酶譜法檢測(cè)SFLLRN和凝血酶對(duì)CNE1-LMP1細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MMP2和MMP9活性的影響。
　　 結(jié)果：PAR1在5株鼻咽癌細(xì)胞系

3、中都存在表達(dá)，其主要分布在細(xì)胞膜和細(xì)胞漿，CNE1-LMP1和SUNE1-5-8F中PAR1的表達(dá)量明顯多于CNE1、CNE2和SUNE1-6-10B，而CNE1-LMP1細(xì)胞中PAR1的表達(dá)量為5株細(xì)胞中最多一株。SFLLRN能夠促進(jìn)CNE1-LMP1細(xì)胞增殖、黏附和體外侵襲。凝血酶亦能提高CNE1-LMP1細(xì)胞的黏附和體外侵襲能力，但其對(duì)細(xì)胞的增殖起雙重作用，0.1～0.5U/ml的凝血酶能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖，而高于0.5U/ml的凝