鉤藤散浸膏對腦梗塞模型大鼠的療效及作用機(jī)理研究.pdf

1、隨著社會人口老齡化，老年人的腦血管疾病逐年增加．血管性癡呆(vascular dementia，VD)已成為妨礙患者生活質(zhì)量的危害老年人健康的嚴(yán)重疾病之一。如何防治這類疾病是當(dāng)前醫(yī)學(xué)界面臨的一個重大課題。中藥鉤藤散(Goutengsan，GTS)源于《本事方》，主治肝經(jīng)熱厥，頭暈?zāi)垦?，胸膈脹痛，煩熱躁渴等，國?nèi)外有將鉤藤散用于臨床治療血管性癡呆癥的報道，但對其確切療效和作用機(jī)理的研究報道較少，本研究進(jìn)行了以下幾方面的實驗，以觀察鉤藤散浸

2、膏對實驗性腦梗塞模型大鼠的療效和作用機(jī)理。研究分為以下幾方面。 鉤藤散浸膏的制備和安全性測定：取處方量藥材飲片分為三組，分別用乙醇熱回流、水煎、水煎醇沉等方法提取制備鉤藤散浸膏，同時測定其安全性。取禁食16h的小白鼠20只，按小鼠的最大給藥量(0.5mL/10g)用鉤藤散浸膏(生藥含量為2625g/mL)灌胃，觀察一周無死亡；再取小鼠30只，按最大給藥量灌胃，觀察小鼠急性毒性反應(yīng)。結(jié)果，小鼠按最大給藥量灌胃后，除給藥后有短時間的

3、不適外，一周內(nèi)未見明顯的急性毒性反應(yīng)。 腦梗塞模型大鼠的制備：取同種大鼠10只，采血、干燥、凝固、研碎、過篩備用，應(yīng)用時用生理鹽水加血凝塊制成200mg/mL血栓混懸液。取同種大鼠120只，麻醉后，頸正中切開暴露左頸總動脈，分離出頸內(nèi)、頸外動脈，用金屬動脈夾暫時夾閉頸總動脈，于左頸動外脈處逆行插管注入血栓鹽水混懸液0.5mL后，立即結(jié)扎頸外動脈，同時開放頸總動脈，使栓子通過頸內(nèi)動脈血流迅速進(jìn)入顱內(nèi)至大腦各動脈，造成多灶性腦梗塞，

4、假手術(shù)組所有手術(shù)操作同造模組，但頸內(nèi)僅注射等量的不含栓子的生理鹽水。術(shù)后第二天進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)觀察、分級。結(jié)果表明：模型組大鼠神經(jīng)行為學(xué)分級均達(dá)到Ⅰ級以上，與假手術(shù)組比有極顯著差異(P<0.001)，由此表明造模成功。 鉤藤散浸膏對腦梗塞模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響：將造模后合格大鼠按神經(jīng)行為學(xué)分級進(jìn)行隨機(jī)分組，分為6組：假手術(shù)組、模型組、陽性藥組、鉤藤散浸膏高、中、低劑量組。陽性藥：灌服吡拉西坦片溶液(0.4g/kg)；鉤藤散浸膏高劑

5、量組灌服5g生藥/kg體重，中劑量組2.5g/kg，低劑量組1.25g/kg，給藥體積為10mL/kg，模型組、假手術(shù)組灌服等容量蒸餾水，1mL/100g；每天給藥一次，連續(xù)3周。分別于術(shù)后10天和20天用迷宮對大鼠的學(xué)習(xí)記憶進(jìn)行測試。結(jié)果表明：手術(shù)10天后，實驗組測試成績明顯好于模型組P<0.01)，并隨劑量的增加而效果越好，呈一定的正相關(guān)，和假手術(shù)組比，無明顯差異。而模型組測試成績顯著差于假手術(shù)組P<0.01)。手術(shù)20天后，同組相

6、比，假手術(shù)組及實驗組測試次數(shù)都有所下降，而模型組測試次數(shù)較10天時幾乎未變，其測試成績極顯著差于假手術(shù)及實驗組(P<0.001)。說明鉤藤散浸膏對腦梗塞模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶有較好的恢復(fù)作用。鉤藤散浸膏對腦梗塞模型大鼠腦組織病理學(xué)的影響：將造模后合格大鼠分為6組：假手術(shù)組、模型組、陽性藥組、鉤藤散浸膏高、中、低劑量組。陽性藥：灌服吡拉西坦片溶液(0.4g/kg)；鉤藤散浸膏高劑量組灌服5g生藥/kg體重，中劑量組2.5g/kg，低劑量組1.

7、25g/kg，給藥體積為10mL/kg，模型組、假手術(shù)組灌服等容量蒸餾水，1mL/100g；每天給藥一次，連續(xù)3周。用藥結(jié)束后，觀察其神經(jīng)行為學(xué)并分級，處死取全腦組織，對梗塞區(qū)作病理組織檢查，并統(tǒng)計死亡率。結(jié)果表明：用藥1周時，模型組死亡率與假手術(shù)組比雖無明顯差異，但要比假手術(shù)組和給藥組高出很多。用藥2周后，各組死亡率相近，無明顯差異。鉤藤散浸膏實驗組神經(jīng)行為學(xué)分級極顯著好于模型組(P<0.001)，而與假手術(shù)組無顯著差異，在細(xì)胞變性、

8、膠質(zhì)增生、血管充血、組織水腫，其程度都極顯著低于模型組(P<0.01)，說明鉤藤散浸膏能有效治療腦梗塞對腦組織的損害、顯著改善腦梗塞大鼠的肢體運動與協(xié)調(diào)功能，控制腦梗塞癥狀，降低死亡率。 鉤藤散浸膏對腦梗塞模型大鼠自由基的影響：將造模后合格大鼠隨機(jī)分為：假手術(shù)組、模型組、陽性藥組、鉤藤散浸膏高、中、低劑量組6組。陽性藥：灌服吡拉西坦片溶液(0.4g/kg)；鉤藤散浸膏高劑量組灌服5g生藥/kg體重，中劑量組205g/kg，低劑量

9、組1.25g/kg，給藥體積為10mL/kg，模型組、假手術(shù)組灌服等容量蒸餾水，1mL/100g；每天給藥一次，連續(xù)3周。用藥結(jié)束后，采血離心、測定MDA、SOD、NO、MAO-B、GSH-PX指標(biāo)。結(jié)果表明：鉤藤散浸膏實驗組SOD活力極顯著高于模型組(P<0.01)，與假手術(shù)組無明顯差異；實驗組MDA含量顯著低于模型組(P<0.01)，實驗組與假手術(shù)組無顯著差異；實驗組GSH-Px含量遠(yuǎn)高于模型組(P<0.001)，和假手術(shù)組相當(dāng)：實