骨髓基質干細胞移植治療肌營養(yǎng)不良mdx鼠的示蹤研究.pdf

1、　　Duchenne肌營養(yǎng)不良是一種X性連鎖遺傳疾病，目前無特效治療。因此，本文為了利用各種示蹤劑標記骨髓基質干細胞移植治療肌營養(yǎng)不良模型的的實驗研究，判斷移植骨髓基質干細胞的治療效果，進行了研究討論。首先，我們采用低糖L-DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)C57/BL/6的股骨骨髓細胞，經過差速貼壁法純化、擴增、傳代觀察骨髓基質干細胞的生長能力；其次研究3H對骨髓基質干細胞的毒性影響，繪制細胞在不同放射性濃度的核素中的生長曲線，并用流式細胞儀觀察不同

2、放射性濃度中細胞的周期分布，凋亡情況，測定不同濃度的核素中的SOD及MDA，了解核素劑量與凋亡的相關性及其簡單機制。第三，觀察了不同核素濃度、不同細胞的代數(shù)、不同接種濃度的細胞的摻入量。應用細胞放射自顯影及激光共聚焦手段比較了3H-TdR與BrdU對骨髓基質干細胞的標記率。第四，了解骨髓基質干細胞在體內如何動態(tài)分布，了解了干細胞的分布情況。第五，利用免疫組化聯(lián)合放射自顯影的方法及免疫雙標記后用激光掃描共聚焦顯微鏡(LSCM)觀察移植骨髓

3、基質干細胞有否表達dystrophin蛋白。根據(jù)研究結果可以得出結論：差速貼壁法能夠很好純化骨髓基質干細胞，其增殖能力從P13開始減低；高濃度的3H-TdR(4uCi/2ml)影響骨髓基質干細胞的分裂增殖能力，其主要機制為阻滯干細胞在S期及G2-M期，引起細胞不同程度的凋亡，產生氧自由基，使細胞內的SOD下降及MDA升高，毒害干細胞；將P4細胞以5×104/ml濃度接種，加入核素濃度為1uCi/2ml時摻入率最高；3H-TdR、BrdU