食管鱗癌及癌前病變Claudin3、4的表達(dá)及臨床病理意義.pdf

1、背景和目的:
　　在全球范圍內(nèi)食管癌為常見(jiàn)的腫瘤,亞洲為食管癌高發(fā)區(qū)域。食管惡性腫瘤可分為兩種截然不同的病理特征,即鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和腺癌。全球大部分的食管癌是鱗癌。鱗狀上皮異型增生(esophageal squamous dysplasia,ESD)是食管鱗癌的重要癌前病變,食管鱗癌的發(fā)生經(jīng)歷了由正常食管鱗狀上皮→食管炎→食管異型增生→食管鱗癌系列演變過(guò)程。盡管食管癌的治療技術(shù)

2、有很大進(jìn)展,但由于檢出的患者多為中晚期,治療效果不佳,因此食管癌大部分病人預(yù)后較差,術(shù)后五年存活率較低。復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移依然是影響食管鱗癌預(yù)后的兩大原因,因此探究食管鱗癌發(fā)生和發(fā)展的分子標(biāo)記對(duì)食管癌的預(yù)防以及治療有著重要的含義。
　　緊密連接(Tight junctions,Tjs)連同粘附連接和橋粒,形成上皮和內(nèi)皮細(xì)胞的頂端連接復(fù)合體。緊密連接是細(xì)胞必不可少的密封口,其可維持組織內(nèi)的滲透壓。同時(shí)緊密連接可形成柵欄,防止膜蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的

3、橫向擴(kuò)散,保持頂部和基底細(xì)胞之間的差異性。最后,緊密連接也可能參與細(xì)胞增殖,分化和其他功能。癌組織常常表現(xiàn)為粘附性消失、TJ的破壞、正常分化的消失和細(xì)胞具有侵襲性。
　　緊密連接主要由三種膜蛋白組成,即粘附分子、occludin和claudins。Claudins是緊密連接的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵分子這一觀點(diǎn)已被廣泛認(rèn)可。迄今為止,已經(jīng)有24種claudins蛋白被克隆,它們的表達(dá)常常呈組織特異性。在不同的內(nèi)皮和上皮組織中不同 clau

4、dins的表達(dá)具有多樣化的的特性。然而值得注意的是 claudins的表達(dá)是具有可塑性的,在不同的內(nèi)環(huán)境中claudin的表達(dá)可發(fā)生改變。研究表明,claudins的異常表達(dá)與許多人類腫瘤的發(fā)生發(fā)展緊密關(guān)聯(lián)。Claudin異常表達(dá)可使組織滲透屏障遭到損壞,細(xì)胞極性完全消失,細(xì)胞與細(xì)胞間的粘附力減小,導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn) claudin的表達(dá)異常與腫瘤的轉(zhuǎn)移和預(yù)后不良有關(guān)。目前有關(guān)食管鱗癌中claudins的表達(dá)情況及其與

5、食管鱗癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系研究較少,claudins在食管鱗癌中的表達(dá)與食管鱗癌患者預(yù)后的關(guān)系亦需進(jìn)一步研究。因此我們檢測(cè)了 claudin3和claudin4在食管鱗癌、食管鱗狀上皮異型增生及食管炎組織中的表達(dá),并探討兩者表達(dá)狀態(tài)與食管鱗癌的臨床病理特點(diǎn)及患者預(yù)后的關(guān)系。
　　方法:
　　1.15例正常食管上皮,20例食管炎組織,20例異型增生標(biāo)本(重度異型增生8例,中度6例,輕度6例)均在內(nèi)鏡下取材,取材后立刻于中性福爾馬林

6、液中固定,石蠟包埋,切片為厚約4μm的連續(xù)切片,然后進(jìn)行HE染色,進(jìn)行組織病理學(xué)診斷。另收集在西南醫(yī)院病理科存檔,有著完整的病理和臨床資料的食管鱗癌及癌旁手術(shù)切除標(biāo)本93例,制作成組織芯片。
　　2.免疫組化Envision法檢測(cè)15例正常食管上皮、20例食管炎、20例食管異型增生和93例食管鱗癌組織claudin3和claudin4的表達(dá)。
　　3.卡方檢驗(yàn)(X2 test)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析食管鱗癌、食管鱗狀上皮異型增生、食

7、管炎和正常食管上皮不同組之間 claudin3和 claudin4的表達(dá)差異,并分析 claudin3和claudin4的表達(dá)與食管癌臨床病理特征的關(guān)系。Kappa檢驗(yàn)和 McNemanr檢驗(yàn)分析claudin3、claudin4表達(dá)的關(guān)系。Kaplan-Meier法分析總體生存率,Log-rank法用于比較不同組間的生存率。
　　結(jié)果:
　　1. Claudin3蛋白主要定位在細(xì)胞膜,胞核及胞質(zhì)亦有少量表達(dá)。Claudin

8、3在食管鱗癌、異型增生、食管炎及正常食管上皮中的表達(dá)率分別為43.0％(40/93)、30%(6/20)、20%(4/20)、6.7%(1/15),正常食管上皮表達(dá)陽(yáng)性率最低,癌組織表達(dá)陽(yáng)性率最高,有顯著性差異(P<0.05),食管鱗癌陽(yáng)性率顯著高于正常食管組織(P<0.05),而食管炎和異型增生組表達(dá)的陽(yáng)性率并無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　2. Claudin4蛋白主要定位在細(xì)胞膜,胞核及胞質(zhì)少有表達(dá)。Claudin4在食

9、管鱗癌組織、異型增生組織、食管炎和正常食管上皮組織中的表達(dá)率分別為45.2%(42/93)、40%(8/20)、35%(7/20)、33.3%(5/15),各組間無(wú)顯著差異性(P>0.05)。
　　3. claudin3和claudin4的表達(dá)與患者的病理分級(jí)、浸潤(rùn)深度、年齡、性別及腫瘤大小無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05),但無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者claudin3和claudin4表達(dá)的陽(yáng)性率顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者高(P<0.05),且生存組

10、的陽(yáng)性率較死亡組高(P<0.05)。
　　4. Claudin3和 claudin4在食管鱗癌表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)顯著差異(P>0.05,McNemar檢驗(yàn)),且兩者表達(dá)存在顯著相關(guān)性(P=0.004,χ2=8.520,K=0.302)
　　5. Kaplan-Meier生存分析發(fā)現(xiàn),與claudin3和claudin4表達(dá)陽(yáng)性組相比,claudin3和claudin4表達(dá)陰性組患者的術(shù)后生存率顯著降低(P<0.05)。
　　

11、結(jié)論:
　　本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),從正常食管上皮到癌組織claudin3表達(dá)陽(yáng)性率逐漸升高,雖然食管炎和異型增生的表達(dá)并無(wú)顯著性差異,但食管鱗癌陽(yáng)性率顯著高于正常食管組織,提示claudin3可能與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。Claudin4在食管鱗癌組織、異型增生組織、食管炎和正常食管上皮組織中的表達(dá)并無(wú)差異,提示其可能與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展無(wú)關(guān)。claudin3、claudin4表達(dá)降低與食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后不良有關(guān),可能成為評(píng)估患者