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文檔簡介
1、脊髓損傷(SCI)導(dǎo)致血管破裂、出血、炎性細(xì)胞滲出、水腫、血栓形成、血管痙攣等,這一系列的因素導(dǎo)致脊髓血流(SCBF)降低,最終引起缺血,缺血又可導(dǎo)致脊髓繼發(fā)性損傷的產(chǎn)生。研究表明:脊髓缺血的嚴(yán)重程度與繼發(fā)性損傷的嚴(yán)重程度具有顯著的相關(guān)性。因此,如何改善SCI后的缺血狀況,成為治療SCI的一個(gè)重要研究熱點(diǎn)。
SXT是一種中成藥,主要成分為水蛭素和蚓激酶,二者均具有強(qiáng)大的促血流作用,因此SXT常用來治療淤血淤滯,在臨床上常用來治
2、療缺血性疾病,如腦梗死和心肌梗死等,并取得了良好的臨床效果,并且未出現(xiàn)不良反應(yīng)。SXT能否促進(jìn)SCI后SCBF的恢復(fù),改善SCI導(dǎo)致的缺血狀況,延緩脊髓繼發(fā)性損傷至今尚未見報(bào)道。因此我們?cè)O(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)來觀察SXT對(duì)SCI的治療作用。
實(shí)驗(yàn)一,我們采用單寧酸—三氯化鐵(Ta-Fe)媒染血管的方法,再結(jié)合HE或蘇木素染色觀察了脊髓擠壓損傷后損傷區(qū)以及損傷邊緣區(qū)血管的形變以及缺血情況。發(fā)現(xiàn)脊髓擠壓傷后,存在兩個(gè)區(qū)域:第一個(gè)區(qū)域靠近損
3、傷中心,缺血較嚴(yán)重,神經(jīng)元已經(jīng)變性消失,屬于不可被挽救區(qū)域;第二個(gè)區(qū)域離損傷中心較遠(yuǎn),靠近第一個(gè)缺血區(qū),該區(qū)域血管已萎縮變細(xì),蘇木素染色較正常區(qū)域蒼白,神經(jīng)元仍舊存在,該區(qū)域?yàn)榭赏炀葏^(qū)域。此外,我們對(duì)出血面積進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)在損傷后0h和8h出血面積最大,從損傷后24h開始,出血面積減小。
在實(shí)驗(yàn)二中,我們亦采用脊髓擠壓損傷模型,在損傷后24h開始給SCI大鼠尾靜脈注射SXT,并用生理鹽水作為對(duì)照,觀察了SXT對(duì)SCI的
4、治療作用,結(jié)果如下:
1、激光多普勒(LDF)測血流量實(shí)驗(yàn)顯示:SXT能夠促進(jìn)SCI大鼠SCBF的恢復(fù)。SXT組大鼠SCBF在SCI0.5h時(shí)為57±6.43%,經(jīng)SXT治療后,到SCI3d時(shí),SCBF恢復(fù)到了78±4.16%,與0.5hSCBF相比,差異顯著(P<0.01),到SCI7d時(shí),SCBF進(jìn)一步恢復(fù)到了84±2.20%,與前兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)相比,亦有顯著性增加(P<0.05);生理鹽水對(duì)照組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,SCBF均沒
5、有顯著性變化(SCI0.5h為58±6.20%,3d時(shí)為65±3.81%,7d時(shí)為61±6.68%,各時(shí)間點(diǎn)SCBF無顯著性差異(P>0.05)。
2、Tarlov?s運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分表明:SXT可顯著增加SCI大鼠的運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分。SCI即刻,生理鹽水組和SXT組大鼠運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分均為0;到SCI7d時(shí),兩組間已經(jīng)出現(xiàn)顯著性差別。生理鹽水組大鼠僅出現(xiàn)髖關(guān)節(jié)和膝關(guān)節(jié)活動(dòng),評(píng)分為1.62±0.52,而SXT組大鼠此時(shí)已可支撐體重,評(píng)分為
6、2.83±0.41,與生理鹽水組大鼠相比,差異顯著(P<0.01);SCI14d時(shí),SXT組大鼠功能繼續(xù)恢復(fù),前肢和后肢出現(xiàn)協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng),功能評(píng)分為3.83±0.41,而生理鹽水組大鼠恢復(fù)到可支撐體重,評(píng)分為2.67±0.52,顯著低于SXT組(P<0.01)。
3、足跡實(shí)驗(yàn)顯示:SXT能顯著促進(jìn)SCI大鼠運(yùn)動(dòng)步態(tài)的恢復(fù)。SCI7d
時(shí),生理鹽水組大鼠足背拖地現(xiàn)象嚴(yán)重,幾乎不能行走,而SXT組大鼠此時(shí)已經(jīng)可以足底著地行走
7、;SCI14d時(shí),生理鹽水組大鼠組恢復(fù)到可以足底著地行走,但足背拖地現(xiàn)象依然嚴(yán)重,而SXT組大鼠此時(shí)功能進(jìn)一步恢復(fù),足背著地現(xiàn)象幾乎消失。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明:與生理鹽水組大鼠相比,在兩個(gè)測量時(shí)間點(diǎn)SXT組足背拖地比率均顯著降低,步長均顯著增長,步寬均顯著減?。≒<0.01)。
4、HE染色和GFAP免疫組化染色均顯示:SXT治療后可縮小損傷區(qū)面積。SCI14d時(shí),生理鹽水組大鼠損傷區(qū)面積為4.01±0.81mm2,SXT組損傷區(qū)面
8、積為2.67±0.36mm2,與生理鹽水組相比,差異顯著(P<0.01)。此外,硫瑾染色顯示:與生理鹽水組大鼠相比,SXT組損傷旁區(qū)神經(jīng)元較多,炎性細(xì)胞較少,組織結(jié)構(gòu)保存較好。
5、NeuN免疫組化染色顯示:SXT治療可保護(hù)損傷旁區(qū)神經(jīng)元。SCI14d時(shí),SXT組NeuN兩個(gè)斷端間的距離(1.95±0.38mm)顯著小于生理鹽水對(duì)照組(2.57±0.25mm)(P<0.05);并且SXT組損傷旁區(qū)神經(jīng)元為56±10.79,顯著
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