核盤菌弱毒相關(guān)RNA病毒（SsDRV）感染雪腐核盤菌的初步研究.pdf

1、核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum)弱毒株Ep-1PN中攜帶兩種真菌病毒，其中SsDRV與毒力衰退相關(guān)，病毒SSRV-L與衰退沒有直接關(guān)系。真菌病毒沒有發(fā)現(xiàn)體外傳播途徑，其傳播和擴(kuò)散依賴菌絲融合(水平傳播)或無性孢子繁殖(垂直傳播)途徑。復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)體不親和性限制了病毒在真菌種內(nèi)菌株間擴(kuò)散。實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)Ep-1PN菌株與雪腐核盤菌(S.nivalis)Let-19菌株菌絲接觸后，Let-19菌株出現(xiàn)衰退現(xiàn)象。Le

2、t-19菌株與Ep-1PN菌株同屬不同種。Ep-1PN菌株中真菌病毒可能出現(xiàn)跨種擴(kuò)散的現(xiàn)象，本論文就真菌病毒種間的傳播進(jìn)行了研究，取得的結(jié)果如下： 1.Let-19菌株與Ep-1PN菌株對(duì)峙培養(yǎng)之后，其繼代培養(yǎng)分離物L(fēng)et-19V的形態(tài)特征與正常毒力菌株Let-19的菌落形態(tài)相比迥異。經(jīng)過再傳染實(shí)驗(yàn)、生長(zhǎng)速度和致病力的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)Let-19V較正常毒力菌株相比具有了生長(zhǎng)速度緩慢、致病力弱等弱毒的表型特征，并且這種癥狀經(jīng)過對(duì)峙培養(yǎng)

3、可傳給Let-19菌株。 2.對(duì)雪腐核盤菌Let-19及其衍生菌株Let-19V進(jìn)行dsRNA的提取并進(jìn)行電泳檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在Let-19V中發(fā)現(xiàn)有2條dsRNA片段，其中一條大小約為6.4kb，與Ep-1PN菌株中的6.4kbdsRNA片段大小一致，而在正常毒力菌株中沒有發(fā)現(xiàn)類似的片段。Northern雜交證實(shí)Let-19V中的6.4kbdsRNA片段為SsDRV的基因組RNA的復(fù)制體形式(dsRNA)。表明Ep-1PN菌株中的S

4、sDRV已經(jīng)傳遞至Let-19菌株。 3.測(cè)定了真菌病毒跨種傳播的頻率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在PDA培養(yǎng)基和新鮮萵苣葉片上傳染概率分別為27％和23％以上。萵苣屬核盤菌和雪腐核盤菌的共同寄主，因此推定在自然界病毒跨種傳播極有可能發(fā)生。 真菌病毒可以通過Zp-1PN菌株向不同種的雪腐核盤菌菌株進(jìn)行高頻率地傳播和擴(kuò)散，說明即使是種間的營(yíng)養(yǎng)不親和性也并非dsRNA在種間轉(zhuǎn)移的絕對(duì)障礙。本研究也表明SsDRV可以在核盤菌以外的真菌中復(fù)制和增