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1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文HLA—A、B、C抗原在肺癌及其轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)及臨床意義姓名:王威申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):外科學(xué)指導(dǎo)教師:李玉2002.4.1r、實(shí)驗(yàn)材料l、病例及組織標(biāo)本選取67例從2001,5_2001,10在中國(guó)醫(yī)大一院確診為原發(fā)性肺癌,并行手術(shù)切除,淋巴結(jié)廓清的患者,病人術(shù)前均未行放化療及免疫治療。其中男48例,女19例,年齡32—78歲,平均58366歲。鱗癌27例,腺癌34例,小細(xì)胞癌6例。術(shù)后立即將腫瘤組織及相應(yīng)正
2、常肺組織(距腫瘤5cm以上)和廓清的淋巴結(jié)用液氮處理,一80℃凍存。2、主要試劑一抗是由美國(guó)Dako公司提供的w掀單克隆抗體:主要抗HIA—A、B、C重鏈抗原決定基。實(shí)驗(yàn)方法l、免疫組化染色每個(gè)凍存組織被制成4um冰凍切片,丙酮固定lO分鐘后充分風(fēng)干,03%H:O:甲醇室溫浸泡20分鐘以滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,l:50正常血清封閉20分鐘,PBS稀釋一抗W們:(1:200)室溫孵育2小時(shí),1:100生物紊標(biāo)記二抗(IgG)室溫孵育30分鐘
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