中藥方劑(麻芎舒痛方)組方設計方法研究.pdf

1、1基于藥效學基礎的麻芎舒痛方組方依據(jù)和劑量篩選
　　 本文首先對中藥復方的組方依據(jù)和劑量篩選進行藥效學研究。以臨床療效為基礎,以《中華人民共和國藥典》為依據(jù),擬定中藥復方基本藥味和用藥范圍。以鎮(zhèn)痛效應為觀察指標,通過正交試驗,觀察不同配比和不同劑量的中藥復方藥物對3種偏頭痛動物模型的藥效影響,篩選出中藥復方藥味配伍及最佳劑量配比。
　　 1.1治療偏頭痛中藥復方藥物不同劑量配伍對硝酸甘油型偏頭痛大鼠行為學的影響
　

2、　 觀察不同藥味配伍和不同劑量配比的中藥復方對硝酸甘油型偏頭痛大鼠撓頭次數(shù)的影響。結(jié)果顯示麻芎舒痛方(樣本十)對偏頭痛大鼠的撓頭次數(shù)有最佳抑制作用。與模型對照組對比,統(tǒng)計學具有顯著性差異(P<0.05)。
　　 1.2治療偏頭痛中藥復方藥物不同劑量配伍對熱板法小鼠鎮(zhèn)痛作用的研究
　　 觀察在熱板法小鼠模型實驗中,不同藥味配伍和不同劑量配比的中藥復方的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示(樣本二、樣本八和樣本十)對小鼠熱板法致痛時間有明顯

3、的延長效應。與模型對照組對比,統(tǒng)計學具有顯著性差異(P<0.05)。
　　 1.3治療偏頭痛中藥復方藥物不同劑量配伍對2％甲醛所致雙相疼痛鎮(zhèn)痛效應影響
　　 觀察不同藥味配伍和不同劑量配比的中藥復方的對2％甲醛所致雙相疼痛鎮(zhèn)痛效應的影響。結(jié)果顯示樣本六、樣本七和樣本十對2％甲醛致痛所產(chǎn)生的Ⅱ相疼痛時間有明顯延長效應。與模型對照組對比,統(tǒng)計學具有顯著性差異(P<0.05)。
　　 綜上所述,以3種動物模型的綜合藥理

4、效應為實驗依據(jù),進行統(tǒng)計學和方差分析,篩選出包含治療偏頭痛的著名藥對和經(jīng)典藥隊的中藥復方-麻芎舒痛方,為治療偏頭痛的中藥復方提供了組方依據(jù)和優(yōu)化劑量。
　　 2不同治則配伍的中藥方劑藥效研究
　　 采用硝酸甘油誘發(fā)的實驗性偏頭痛大鼠模型,以與偏頭痛相關的5-HT作為藥效學重要指標之一,觀察不同治則組成的中藥復方對大鼠腦組織和血清中的多種指標的影響,進一步確證麻芎舒痛方的藥理作用。
　　 對正常對照組、模型組、陽性

5、藥對照組和中藥復方治則配伍組在偏頭痛大鼠血清中5-HT、CGRP和ET-1的含量進行統(tǒng)計分析,結(jié)果表明:與模型組相比,天麻、川芎配伍組可以顯著降低偏頭痛大鼠血清中5-HT含量(P<0.05)。麻芎舒通方水提物可以顯著降低偏頭痛大鼠血清中5-HT和ET-1含量(P<0.05)。麻芎舒通方醇提物可以顯著降低偏頭痛大鼠血清中CGRP、ET-1和5-HT含量(P<0.05)。
　　 對正常對照組、模型組、陽性藥對照組和中藥復方治則配伍組

6、在偏頭痛大鼠腦組織中5-HT含量進行統(tǒng)計分析,結(jié)果表明:與模型對照組相比,天麻川芎配伍組、麻芎舒通方水提物和麻芎舒通方醇提物均可以顯著降低偏頭痛大鼠腦組織中在5-HT含量(P<0.05)。
　　 對不同治則配伍的中藥方劑進行藥效研究,結(jié)果顯示:以平肝降火、活血行氣、散通絡止痛為治則的麻芎舒通方藥效優(yōu)于天麻、川芎配伍組。不同的提取工藝具有不同的藥理效應,麻芎舒通方乙醇提取優(yōu)于水煎提取。
　　 3中藥復方(麻芎舒痛方)的藥學

7、研究
　　 如何正確地評價中藥制備工藝的合理與優(yōu)劣,是目前困擾中藥研究的問題之一。中藥復方藥學研究是中藥復方研究的基礎,盡可能地將發(fā)揮藥效和發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎提取出來,才能更好地運用于臨床,服務于患者。最佳制備工藝研究是中藥復方藥學研究的關鍵環(huán)節(jié)。
　　 3.1川芎不同提取部位治療偏頭痛的藥效學研究
　　 本文在比較關鍵的藥物或不好確定藥物提取路線時,以藥效學試驗為依據(jù),對川芎多種提取物進行比較,將中藥化學-藥理

8、效應相結(jié)合,并采用HPLC-ECD技術測定偏頭痛大鼠血液和腦組織中的5-HT含量,最終確定川芎乙醇提取；通過對其余四味藥物化學成分和藥理成果的分析,確定四味藥物醇提。
　　 3.2中藥復方提取路線和提取方式的確定
　　 以君臣藥物的有效成分為指標,對復方的混合提取方式和單獨提取方式進行考察,天麻素混和提取/單獨提取的比值是102.42％,葛根素混和提取/單獨提取的比值是108.54％,說明混合提取更有利于天麻和葛根中有效

9、成分的提取。阿魏酸混和提取/單獨提取的比值是99.46％,說明對于阿魏酸來說,混合提取和單獨提取基本相當。從大生產(chǎn)和成本考慮,川芎亦選擇混合提取方式。
　　 3.3麻芎舒痛方的制備工藝研究
　　 以L9(34)正交試驗進行最佳工藝條件的篩選和驗證,確定了復方的最佳制備工藝,即五味藥物以8倍量60％的乙醇提取3次,每次2小時。此工藝在保證君藥有效成分提取的同時,兼顧了兩味臣藥有效成分的提取。五味藥物同時提取,具有成本降低、

10、工藝簡單有效之優(yōu)點,有利于大生產(chǎn)。
　　 4中藥復方(麻芎舒痛方)的制劑質(zhì)量控制
　　 4.1儀器與試藥
　　 高效液相色譜儀:Waters600泵,Waters996檢測器,Waters717自動進樣器,Millennium32 Login工作站；薄層掃描儀,型號:TRANSILLUMINATOR2020D；空氣壓縮泵,TOSHIBA Corporation生產(chǎn)；阿魏酸、天麻素、葛根素、川芎對照藥材和白芷對照藥

11、材為對照品或?qū)φ账幉摹?br>　　 4.2 TLC色譜鑒別
　　 照中國藥典薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗,對川芎、天麻和葛根進行TLC定性鑒別。川芎的薄層色譜鑒別采用川芎對照藥材,以正已烷-醋酸乙酯(9:1)為展開劑,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點；葛根的薄層色譜鑒別采用葛根素對照品,以氯仿-甲醇-水(7:2.5:0.25)為展開劑,供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點

12、；白芷的薄層鑒別采用白芷對照藥材,以石油醚(60-90℃)-乙醚(1:1)為展開劑,。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照均無干擾。
　　 4.3含量測定
　　 4.3.1樣品中阿魏酸的含量測定
　　 色譜柱:SymmetryC18(3.9×150 mm,5μm)；流動相A:乙腈-0.05％醋酸水溶液,流動相B:甲醇。0～45 min,A由100％至60％,B由0％至40％,4