龍里冬青和貓兒刺的化學(xué)成分及生物活性研究.pdf

1、龍里冬青Ilex dunniana Levl.和貓兒刺Ilex pernyi Franch．為冬青科(Aquifoliaceae)冬青屬常綠灌木或小喬木，分布于秦嶺以南及長江流域以南各省區(qū)。
　　 冬青屬植物中有30 多個品種為傳統(tǒng)中藥材，具有清熱解毒、消炎、鎮(zhèn)咳祛痰以及治療心血管疾病的作用。
　　 炎癥 (inflammation)是一種極為常見而又重要的病理過程，許多常見疾病如癤、肺炎、腸炎、外傷感染及各種傳染病都是

2、炎癥性疾病。炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷因子所引發(fā)的復(fù)雜防御反應(yīng)，其中心環(huán)節(jié)是血管反應(yīng)。絕大多數(shù)的心腦血管病包括動脈粥樣硬化、腦卒中、高血壓、心功能不全等都是慢性炎癥反應(yīng)性疾病。隨著自由基醫(yī)學(xué)的發(fā)展，對氧化應(yīng)激反應(yīng)在各種疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中的認(rèn)識也不斷加深。研究證明氧化應(yīng)激與癌癥、心腦血管疾病、糖尿病及衰老的發(fā)生等密切相關(guān)。
　　 因此，我們認(rèn)為對能用于治療上述疾病及相關(guān)病征的傳統(tǒng)中藥，在作用機(jī)制不明了的情況下，考察其抗

3、炎作用及抗氧化能力對于深入了解它們的藥理作用及機(jī)制具有重要意義。本課題以龍里冬青和貓兒刺枝葉作為研究對象，開展了如下研究。
　　 一．活性部位的篩選通過小鼠耳腫脹急性炎癥和大鼠肉芽腫炎癥模型考察兩種植物90％乙醇提取物的抗炎作用。結(jié)果顯示，兩種植物提取物均具有一定抑制炎癥發(fā)生的作用，且呈量效關(guān)系。在此基礎(chǔ)上，將兩者的總提取物分別分離成了四個不同極性部位，考察它們對細(xì)胞中炎癥及致炎因子的抑制作用，結(jié)果表明貓兒刺和龍里冬青兩種植物抗

4、炎作用活性最強(qiáng)的部位均為正丁醇提取物。
　　 通過總抗氧化能力 (T-AOC)以及DPPH 自由基和羥自由基清除率指標(biāo)考察了兩種植物總提取物及各個極性部位的抗氧化能力。結(jié)果顯示，貓兒刺的乙酸乙酯部位、正丁醇部位和龍里冬青的正丁醇部位比總提取物及其他部位活性更強(qiáng)。
　　 二．活性部位化學(xué)成分的分離與鑒定基于活性部位篩選結(jié)果，本課題針對龍里冬青的正丁醇部位、貓兒刺的乙酸乙酯部位和正丁醇部位進(jìn)行了進(jìn)一步的分離工作。
　　

5、 1．從龍里冬青中共分離得到并鑒定了18個化合物，其中dunnianaolide A (ID6)、dunnianaolide B (ID12)、dunnianaolide C (ID16)、rotundioic acid 28-O-β-D-glucopyranoside (ID8)和3-O-β-D-glucopyranosyl-rotundic acid 28-O-β-D-glucopyranoside (ID37)5個化合物為三萜皂

6、苷類化合物；4-[(erythro)2,3-dihydro-3-hydroxy-methyl-5-(3-hydroxypropyl)-7-methoxy-2-benzofuranyl]-2,6-dimethoxyphenyl-β-D-glucopyranoside (ID14)、(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferylalcohol-9-β-D-glucopyranoside(ID19)、落葉松脂素-4-O-β

7、-D-吡喃葡萄糖苷 (ID33)3個化合物為木脂素類化合物；槲皮素 (ID1)、異槲皮苷 (ID2)、蘆丁(ID3)、山奈酚-3-蕓香糖苷 (ID4)、山奈酚-3-刺槐糖苷 (ID7)、山奈酚-3-葡萄糖苷 (ID9)6個化合物為黃酮及黃酮苷類化合物；還有其他類型化合物4個β-谷甾醇 (ID5)、β-胡蘿卜苷 (ID18)、對羥基苯甲酸 (ID20)、蔗糖 (ID21)。上述18個化合物均為首次從龍里冬青中分離得到，ID6、ID12和I

8、D16 為新化合物，并得到ID6 單晶，提供了ID6 X-ray 單晶衍射數(shù)據(jù)。
　　 2．從貓兒刺中共分離得到并鑒定了23個化合物，其中α-香樹脂 (IP1)、熊果醇(IP2)、熊果酸 (IP3-1)、齊墩果酸 (IP3-2)、3α,19α-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid (IP4)、羽扇豆烯 (IP5-1)、白樺脂酸 (IP5-2)、lup-20(29)-ene-3β,24-diol (IP6)

9、、3β-hydroxyurs-11-ene-13β-olide (IP7)、β-香樹脂酮 (IP8-1)、羽扇豆酮 (IP8-2)、urs-12(13)-en-3-one (IP8-3)、無羈萜 (IP9)、(3β)-3-(β-D-glucopyranosyloxy)-19,23-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid (IP12-1)和(3β)-3-(β-D-glucopyranosyloxy)-hederage

10、nin (IP12-2)14個為三萜及其苷類化合物；槲皮素 (IP13)，異槲皮苷(IP14)，蘆丁 (IP17)3個為黃酮及黃酮苷類化合物； 5,6,11,12-tetramethyltritriaconta-5,11,17,23,29-pentaenoate (IP10)、十七酸 (IP11-1)、十七酸甲酯(IP11-2)3個為脂肪酸類化合物；以及β-谷甾醇 (IP15)、β-胡蘿卜苷 (IP16)2個甾體化合物。其中化合物IP8

11、-1、IP8-2、IP8-3、IP10、IP11-1、IP11-2和IP12-1 為首次從該植物中分離得到。
　　 三．主要成分活性篩選本課題對分離得到的部分化合物進(jìn)行了活性篩選。單體化合物對細(xì)胞炎癥、致炎因子抑制作用實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示三萜皂苷類化合物ID6、ID8、ID12和ID16 對LPS 誘導(dǎo)RAW264.7的致炎因子TNF-α、PGE2和IL-1β均有明顯的抑制作用；ID16 同時還對NO的產(chǎn)生有很好的抑制作用，在劑量較大