高產(chǎn)蝦青素紅法夫酵母的選育及菌種特性研究.pdf

1、蝦青素（3，3’-二羥基-β,β’-胡蘿卜素-4，4’-二酮）是生物界廣泛存在的一種類胡蘿卜素類物質(zhì)，具有抗氧化、抗腫瘤、抗輻射、抗衰老、提高免疫力等多種生物學(xué)功能，在食品、水產(chǎn)養(yǎng)殖、醫(yī)藥、飼料等行業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用前景。
　　 紅法夫酵母是一種重要的天然蝦青素資源。目前，野生法夫酵母菌株中蝦青素的含量很低，無法滿足工業(yè)化生產(chǎn)的需要。因此篩選出溫度適應(yīng)范圍廣、生長速率快、蝦青素含量高的法夫酵母突變株一直是努力的方向。為提高法夫酵

2、母生產(chǎn)蝦青素的產(chǎn)量和提高其發(fā)酵溫度，本研究選用紫外線（UV）、低能氬離子注入、亞硝基胍（NTG）依次處理紅法夫酵母，測定各種誘變劑處理后法夫酵母的致死率和正變率，根據(jù)實驗結(jié)果確定合適的誘變劑量。同時，結(jié)合選擇性培養(yǎng)基的篩選作用，篩選出生長速度快、蝦青素含量高的突變株，并對其遺傳穩(wěn)定性和色素成分進(jìn)行分析。
　　 實驗結(jié)果表明：氬離子注入法夫酵母的致死率曲線呈現(xiàn)特有的“馬鞍型”，即氬離子注入0－3 min時，法夫酵母的死亡率逐漸上升

3、，注入時間在3－7 min時，死亡率呈下降趨勢，而當(dāng)注入時間大于9 min時，死亡率再次緩慢上升；當(dāng)氬離子注入7 min時，正變率達(dá)最大值36.72％。紫外線照射3－9 min，法夫酵母的死亡率70％－95％。
　　 蘸有亞硝基胍的濾紙片平板周圍有菌落長出，菌落密度由中央向平板邊緣呈現(xiàn)明顯的梯度上升的趨勢。
　　 各種誘變劑處理后，各組存活菌株的生長和蝦青素積累情況同對照株相比發(fā)生了變化：氬離子注入實驗中，獲得穩(wěn)定高產(chǎn)突

4、變株GAR226，蝦青素產(chǎn)量達(dá)到7850μg/L，含量為592.5 μg/g DCW，較出發(fā)菌株GY826 分別提高119.83％和96.45％；
　　 紫外線誘變實驗中，獲得穩(wěn)定高產(chǎn)突變株GUV49，蝦青素產(chǎn)量達(dá)到10321 μg/L，含量為713.8 μg/g DCW，較出發(fā)菌株GAR226 分別提高31.48％和20.47％；在亞硝基胍誘變實驗中，獲得穩(wěn)定高產(chǎn)突變株GNG274，蝦青素產(chǎn)量達(dá)到16897 μg/L，含量為9