NOD1-NF-κB信號(hào)通路在幽門螺桿菌感染小鼠胃組織中的激活.pdf

1、目的：
　　構(gòu)建幽門螺桿菌(Helicobacter pylori, H. pylori)感染C57BL/6小鼠動(dòng)物模型，檢測(cè)NOD1-NF-κB信號(hào)通路在小鼠胃組織的激活情況，研究其在H. pylori感染引起的炎癥反應(yīng)中的作用。
　　方法：
　　6～8周齡C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和不同濃度H. pylori感染組。每48h分別以PBS和H. pylori灌胃1次，共5次。4周后，培養(yǎng)法鑒定是否感染成功；不同

2、時(shí)間點(diǎn)處死小鼠，無菌獲取胃組織或血液檢測(cè)以下指標(biāo)：
　　（1）HE染色法鑒定感染小鼠胃組織炎癥程度的變化；
　　（2）RT-PCR檢測(cè)小鼠胃組織中NOD1、RIP2的表達(dá)情況；
　　（3）ELISA檢測(cè)血清中IFN-β和干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IFN-γ-inducible protein-10，IP-10）的濃度；
　?。?）提取核蛋白，Western blot檢測(cè)胃組織中p65的核轉(zhuǎn)位情況。
　　結(jié)果：

3、r>　　(1)成功構(gòu)建了H. pylori感染模型，在整個(gè)建模過程中，無小鼠因感染H. pylori死亡。對(duì)照組小鼠胃組織正常，H. pylori感染后可以看到胃組織腺體減少，并成一定程度的萎縮，肌層間質(zhì)有炎癥細(xì)胞浸潤；
　　(2) H. pylori感染后，與對(duì)照組相比，模型組中IP-10和IFN-β含量均有一定程度的增高；其中H. pylori感染后16周達(dá)到高峰；
　　(3)感染組小鼠胃組織中NOD1 mRNA表達(dá)水平

4、在24～120h時(shí)間段均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。在感染后48h，NOD1 mRNA表達(dá)水平最高，隨后表達(dá)量開始緩慢下降；
　　(4) H. pylori感染后RIP2 mRNA表達(dá)顯著上調(diào)，48h達(dá)到高峰，72h后表達(dá)水平開始下降。而在感染后期120h時(shí)表達(dá)量又會(huì)升高；
　　(5) H. pylori感染組在感染后24～120h時(shí)間段胃組織中NF-κB p65的表達(dá)量與對(duì)照組相比顯著增高，48h時(shí)達(dá)到峰值，隨后表達(dá)量