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1、目的:觀察不同負(fù)壓模擬罐法對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移的變化以及從血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的血管舒縮物質(zhì):前列環(huán)素、內(nèi)皮素和血栓調(diào)節(jié)蛋白的變化,說(shuō)明拔罐“活血行氣、活血化瘀”的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制。
方法:選擇指數(shù)期生長(zhǎng)的相對(duì)穩(wěn)定的第五代或第六代人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,將其接種到自行設(shè)計(jì)的彈性血管模型中培育,待其完全貼壁后分組:對(duì)照組(一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓)、低負(fù)壓(-40kPa)和高負(fù)壓組(-80kPa),對(duì)照組放在培養(yǎng)箱培養(yǎng),負(fù)壓組放入模
2、擬罐法的負(fù)壓環(huán)境中并進(jìn)行持續(xù)穩(wěn)定的負(fù)壓干預(yù)。通過(guò)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和MTT檢測(cè)方法反映細(xì)胞增殖的水平,通過(guò)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)反映細(xì)胞遷移和修復(fù)的水平,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定模擬罐法不同負(fù)壓,細(xì)胞所分泌的前列環(huán)素、內(nèi)皮素和血栓調(diào)節(jié)蛋白的水平,反映模擬罐法負(fù)壓對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管舒縮物質(zhì)的影響和調(diào)控。
結(jié)果:通過(guò)觀察模擬罐法負(fù)壓下的細(xì)胞并與對(duì)照組相比較,負(fù)壓組的細(xì)胞生長(zhǎng)速度比對(duì)照組快;MTT檢測(cè)的細(xì)胞吸光值(490nm),負(fù)壓組比空
3、白對(duì)照組顯著增加(P<0.01),高負(fù)壓組的吸光值高于低負(fù)壓組(P<0.05)。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)中,負(fù)壓組細(xì)胞遷移修復(fù)劃痕的能力高于對(duì)照組(P<0.01),負(fù)壓組的細(xì)胞遷移率高于空白對(duì)照組(P<0.01),高負(fù)壓組細(xì)胞遷移率比低負(fù)壓組高(P<0.01)。與空白對(duì)照組相比,負(fù)壓組都能夠促進(jìn)細(xì)胞分泌前列環(huán)素、內(nèi)皮素和血栓調(diào)節(jié)蛋白(P<0.01),高負(fù)壓組細(xì)胞分泌的血管舒縮物質(zhì)濃度比低負(fù)壓組高。
結(jié)論:模擬罐法負(fù)壓刺激體外絡(luò)脈,能夠促進(jìn)
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