小腦皮質(zhì)顆粒與分子層對面部刺激反應(yīng)的場電位特征.pdf

1、外部信息通過爬行纖維和苔狀纖維傳入小腦皮層后，調(diào)節(jié)神經(jīng)元活動，參與運動調(diào)節(jié)和運動學(xué)習(xí)，可是有關(guān)外部相關(guān)信息在哺乳動物小腦皮質(zhì)中傳遞的細(xì)胞、突觸以及動力學(xué)機制還不明確。因此，本研究應(yīng)用局部場電位記錄結(jié)合藥理學(xué)技術(shù)，研究小鼠小腦皮質(zhì)顆粒層和分子層對感覺刺激三叉神經(jīng)的場電位反應(yīng)特征，明確感覺刺激誘發(fā)小鼠小腦皮層顆粒細(xì)胞層和分子層場電位反應(yīng)動力學(xué)特征及藥理學(xué)機制。
　　實驗選用6-8周齡的昆明小鼠，經(jīng)腹腔注射劑量為1.3 g/kg的烏拉坦

2、麻醉后，在小腦 Crus II小葉進(jìn)行開顱術(shù)，開孔直徑約為1.5毫米，仔細(xì)除去該部位硬腦膜后，用泵給暴露部位的腦表面持續(xù)灌流人造腦脊液；面部刺激選用一定壓力的瞬間吹風(fēng)刺激刺激相同側(cè)胡須墊（5-500 ms，50-60 psi），刺激裝置由電腦和膜片鉗記錄軟件控制 MASTER-8，并且與電生理信號記錄同步進(jìn)行；場電位記錄部位選用顆粒與分子層，在記錄的電極內(nèi)部灌裝20-30 ul人工腦脊液，電極電阻大概為4-6 MΩ；通過美國產(chǎn)膜片鉗之放

3、大器（Axopatch-200B）及Clampfit10.3數(shù)據(jù)收集軟件記錄面部刺激誘發(fā)顆粒和分子層的場電位反應(yīng)；電生理實驗數(shù)據(jù)分析采用膜片鉗數(shù)據(jù)分析軟件（版本10.3）。各組數(shù)據(jù)均用《均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤》來表示，樣本數(shù)用n表示。相關(guān)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)的分析應(yīng)用SPSS軟件（版本16.0），采用paired-T檢驗比較均數(shù)，當(dāng)P小于0.05時，可以認(rèn)為有顯著性差異。
　　本實驗有如下結(jié)果：
　?。?）在烏拉坦麻醉下，吹風(fēng)刺激小鼠同側(cè)觸須

4、墊可誘發(fā)分子層產(chǎn)生場電位反應(yīng)，表現(xiàn)為如下波形：（1）N1,瞬間負(fù)極性波；（2）P1，大的正極性波，N1平均的振幅值為0.13±0.06 mV，P1平均振幅值為0.36±0.08 mV。反應(yīng)潛伏期的平均值為13.21±0.32 ms。吹風(fēng)刺激結(jié)束可以誘發(fā)場電位反應(yīng)（P2），但需要刺激時間大于60ms。
　?。?）A型GABA受體（GABAA）的阻斷劑一方面完全地阻斷了P1，并出現(xiàn)了N2，也就是第二個負(fù)波，表明信息經(jīng)PF傳人后產(chǎn)生N1

5、，浦肯野細(xì)胞被抑制后產(chǎn)生由 GABAA受體介導(dǎo)的P1，GABAA受體的活性被阻斷后，面部刺激導(dǎo)致浦肯野細(xì)胞興奮并出現(xiàn)了N2。
　?。?）吹風(fēng)刺激可誘發(fā)小腦Crus II區(qū)顆粒細(xì)胞層產(chǎn)生場電位反應(yīng)，當(dāng)刺激持續(xù)時間為5-10 ms時，可誘發(fā)單峰場電位反應(yīng)。當(dāng)刺激持續(xù)時間大于30 ms時，吹風(fēng)刺激誘發(fā)雙峰反應(yīng)，第一個峰值（N1）為刺激開始反應(yīng)，其振幅的平均值為0.82±0.06 mV，具有“全和無”特征。第二峰值（N2）為刺激結(jié)束反應(yīng)，

6、其振幅隨著刺激持續(xù)時間的增加而增大。
　?。?）小腦皮質(zhì)顆粒層對面部刺激的反應(yīng)表現(xiàn)為很高的反應(yīng)頻率特性，刺激頻率從1 Hz-33 Hz的刺激串，可誘發(fā)顆粒細(xì)胞層反應(yīng)，但隨著刺激頻率的增高，在第一個反應(yīng)后可出現(xiàn)不同程度的反應(yīng)壓抑現(xiàn)象。刺激頻率大于4 Hz時，第二個反應(yīng)開始振幅顯著減小（P<0.05）。
　?。?）腦表面灌流 TTX完全阻斷感覺刺激誘發(fā)顆粒細(xì)胞層場電位反應(yīng)，N1峰值降至給藥前的4.6±1.31％（P<0.001）