基于靜電吸附作用固定生物分子的免疫傳感器的研究.pdf

1、物傳感器中生物活性物質(zhì)的固定是改善傳感器性能最關鍵的步驟之一.傳統(tǒng)的同定方法如共價鍵合和包埋法等對同定在傳感界面上的生物活性物質(zhì)的活性影響較大,如采用靜電吸附或非特異吸附來實現(xiàn)生物活性物質(zhì)的同定,可以很大程度上解決上述問題.該文試利用殼聚糖,改性褐藻酸鈉和納米二氧化鈦等幾種不同性質(zhì)的物質(zhì)通過靜電吸附或者非特異吸附來實現(xiàn)生物活性物質(zhì)的同定.1)研制了一種基于殼聚糖和溴化氰改性褐藻酸鈉凝集作用的日本血吸蟲安培免疫傳感器.褐藻酸鈉—抗體復合物

2、通過靜電吸附作用被凝集到含石墨—石蠟—殼聚糖組分的電極表面,然后與抗原和酶標抗原進行競爭反應,以鄰氨基酚為電子媒介,通過測定酶催化下雙氧水對其氧化的電流大小來間接測定抗原的濃度.響應電流與血.吸蟲抗原在0.64-40 μg/mL之間呈準線性關系.2)利用納米二氧化鈦顆粒與碳粉的協(xié)同作用,制備了一種高靈敏度的過氧化氫傳感器.辣根過氧化物酶通過與納米二氧化鈦之間的靜電力和碳粉的非特異吸附而同定在電極表面,以鄰苯二酚為電子媒介,對過氧化氧進行

3、了測定.HRP酶的響應電流在2.4×10<'-4>--3×10<'-7>mol/L的H<,2的濃度范圍內(nèi)呈線性關系,靈敏度為0.1101 AL mol<'-1>cm<'-2>,校正系數(shù)為0.993(n=13).二.酶聯(lián)熒光免疫體系中底物的研究.酶聯(lián)熒光免疫體系中的關鍵部分在于生物活性物質(zhì)的同定和熒光底物的選擇.該文試發(fā)展幾種新的熒光底物用于酶聯(lián)熒光免疫體系的檢測.3)將納米TiO2顆粒用作固定抗體的載體,以辣根過氧化物酶標記

4、C3補體(HRP-C3),HRP-C3與待測C3發(fā)生競爭性免疫反應,反應的HRP-C3可催化熒光底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)轉(zhuǎn)化為無熒光物質(zhì),由測得TMB+H<,2>O<,2>混合底物溶液的熒光降低的大小判斷待測C3的濃度.熒光值與C3補體在6.5ng/mL到75ng/mL之間呈準線性關系,相關系數(shù)為0.973.4)以聚苯乙烯(PS)制成支持體,通過疏水性非特異吸附將IgG同定在其表面,然后與GaIgG和酶標GaIgG