基因工程HBV-HEV嵌合病毒樣顆粒在畢赤酵母中的制備及其特性的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、戊型肝炎病毒（HEV）是引起腸道傳播的非甲非乙型急性肝炎的病原體.由于缺少穩(wěn)定可靠的HEV體外長期培養(yǎng)系統(tǒng),滅活疫苗和減毒活疫苗的研制受到限制.目前,疫苗研究主要集中于開放讀碼框架2（ORF2）編碼的重組多肽.迄今所發(fā)現(xiàn)的唯一的中和表位定于ORF2蛋白的第578和第607氨基酸（aa）之間的區(qū)域.該區(qū)域?qū)τ谡T發(fā)保護(hù)性免疫至關(guān)重要.我們分別將HEV ORF2中編碼aa551-606和aa578-607的基因片段通過一段柔性的甘氨酸鉸鏈與H

2、BsAg基因的3'端相連,構(gòu)建了2個(gè)HBV/HEV融合基因.二者在畢赤酵母細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的產(chǎn)物分別為分子量約32kDa和29kDa的融合蛋白,均具有組裝成HBV/HEV嵌合病毒樣顆粒（VLP）的能力.兩種嵌合VLP在CsCl密度梯度超離心中的沉降行為和電鏡觀察的形態(tài)學(xué)特征與HBsAgVLP相似.ELISA結(jié)果顯示嵌合VLP可被HBsAg VLP特異性的單克隆抗體高水平識(shí)別.因與具有強(qiáng)免疫原性的HBsAgVLP的相似性,嵌合VLP可能賦予其H

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