臨床病毒性腦炎標(biāo)本的博爾納病病毒核酸檢測(cè).pdf

1、目的：檢測(cè)不明原因病毒性腦炎(VE)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral bloodmononuclear cells，PBMCs)中博爾納病病毒(Borna Disease Virus，BDV)p24基因，探討不明原因的病毒性腦炎患者與BDV感染的關(guān)系及BDV陽性患者的臨床特征。 方法：1、根據(jù)BDV p24基因序列，設(shè)計(jì)并合成引物和熒光標(biāo)記探針。以陽性質(zhì)粒做陽性模板，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定和樣品檢測(cè)，建立檢測(cè)BDV的FQ-

2、nRT-PCR方法。 2、用已建立的FQ-nRT-PCR方法檢測(cè)52份不明原因的病毒性腦炎患者和30例健康外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中BDV p24基因片段。同時(shí)用β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)作為內(nèi)參照，并對(duì)陽性產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序分析和總結(jié)陽性患者的臨床特征。 結(jié)果：52例病毒性腦炎PBMCs標(biāo)本BDV p24基因片段FQ-nRT-PCR檢出率13.46％(7/52，拷貝數(shù)>102kb/μl。對(duì)照組30例正常體檢者均為陰

3、性(0％，0/30)，經(jīng)比較兩者間陽性率有顯著性差異(P<0.05)。PBMCs所含目的基因片段陽性產(chǎn)物測(cè)序后，與BDV標(biāo)準(zhǔn)病毒株V和馬源的BDV病毒株H1766序列比較同源性分別為95.35％和98.84％。在4個(gè)位點(diǎn)出現(xiàn)基因突變(nt1649 T→C，nt1656 G→A，nt1670 C→T，nt1676C→T)。該目的基因片段與馬源的BDV病毒株親緣關(guān)系最近。BDV p24陽性腦炎患者主要以精神行為異常為臨床特征。 結(jié)論