扶正排毒3號對氫化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能的影響.pdf

1、目的:擬通過小鼠腹腔單核巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能、血清溶血素和溶血空斑形成、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能、外周血CD4+、CD8+細(xì)胞水平及小鼠淋巴細(xì)胞CD28表達(dá)水平來觀察扶正排毒3號對氫化可的松(Hydrocortisone,HY)所致免疫功能低下小鼠免疫功能狀態(tài)的影響,來探討扶正排毒3號提高免疫抑制小鼠免疫功能的機(jī)理,為治療無癥狀HIV感染期中藥制劑的研制奠定基礎(chǔ)。
　　方法:實(shí)驗(yàn)于2009-02/10在河南省弘新藥品科技研究所完成。實(shí)

2、驗(yàn)分為5批,每批選用小鼠60只,隨機(jī)數(shù)字表法分為6組,每組10只,其中5組皮下注射氫化可的松制備免疫抑制小鼠模型。于造模第1天,高、中、低劑量扶正排毒片組分別灌服10,5,2.5g/kg扶正排毒3號(西洋參、淫羊藿、山藥、白術(shù)、茯苓、巴戟天、連翹、白花蛇舌草、甘草等藥組成,河南中醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院),香菇多糖片組灌服0.6g/kg,模型組灌服同體積的生理鹽水。另有一組為空白對照組,每鼠僅灌服同體積的生理鹽水。每天給藥1次,連續(xù)給藥8天,

3、給藥容積均為0.2ml/10g體重。給藥第4～7天,除空白對照組外,各組頸部皮下注射氫化可的松50mg/kg(5mg/ml,0.1ml/10g體重),用于造模。①實(shí)驗(yàn)1:第1批小鼠于第8天早上每鼠均腹腔注射5％雞紅細(xì)胞液0.5mL,于給雞紅細(xì)胞2h后給藥,給藥后2h,即給雞紅細(xì)胞后4h處死小鼠,脫頸椎處死小鼠。觀察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬情況。②實(shí)驗(yàn)2:第2批小鼠于給藥第1天每鼠腹腔注射5%雞紅細(xì)胞液0.2mL,于最后一次給藥后2h,小鼠眼

4、眶取血,分離血清。取上清液于UV-2000型分光光度計540nm處比色。觀察溶血素形成情況。③實(shí)驗(yàn)3:第3批小鼠于給藥第1,2,3天每鼠加肌注0.8g/L植物血凝素(8mg/kg),于最后一次給藥后2h,小鼠剪尾取血,推片,瑞氏染色,油鏡觀察,計算外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化百分率。④第4批小鼠于第7天給藥后6小時,摘眼球取血,EDTA抗凝,流氏細(xì)胞儀檢測小鼠外周血CD4+、CD8+細(xì)胞水平及小鼠淋巴細(xì)胞CD28表達(dá)水平。
　　結(jié)果:①與模

5、型組比,高、中、低劑量扶正排毒3號組和香菇多糖片組均可顯著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞的吞噬百分率(P<0.05),高、中、低劑量扶正排毒3號組和香菇多糖片組可明顯提高腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)(P<0.05)②與模型組比,高、中、低劑量扶正排毒3號組和香菇多糖片組可顯著促進(jìn)小鼠溶血素的生成(P<0.05)。③與模型組比,高、中、低劑量扶正排毒3號組和香菇多糖片組均可使外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著升高(P<0.05)。④扶正排毒3號中、

6、低劑量組及香菇菌多糖組能提高免疫抑制小鼠的CD4+細(xì)胞百分?jǐn)?shù)值,而扶正排毒3號低劑量組作用更明顯;扶正排毒3號中、低劑量組能提高免疫抑制小鼠外周血CD8+細(xì)胞百分?jǐn)?shù)值;扶正排毒3號中劑量組、香菇菌多糖組能提高免疫抑制小鼠外周血CD4+/CD8+比值。⑤扶正排毒3號各劑量中、低劑量組及香菇菌多糖組均能提高免疫抑制小鼠的CD28百分?jǐn)?shù)值,而扶正排毒3號低劑量組作用更明顯。
　　結(jié)論:
　?、侔局略?dú)鈸p傷是艾滋病重要病機(jī),精氣虧

7、虛、元?dú)獠蛔闶前滩“l(fā)病的內(nèi)因;②把“無癥狀帶毒期”作為中醫(yī)藥治療艾滋病的切入點(diǎn)的觀點(diǎn),利用中醫(yī)藥的優(yōu)勢早期干預(yù),能夠提高患者生存質(zhì)量,穩(wěn)定和增強(qiáng)免疫功能;③氫化可的松致免疫低下的小鼠模型為一種傳統(tǒng)可行、操作性強(qiáng)、重復(fù)性好的模型,適用于“扶正排毒3號”免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究;④扶正排毒3號可提高腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù),促進(jìn)小鼠溶血素和空斑形成細(xì)胞的生成,使外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率升高,能提高免疫抑制小鼠的CD4+、CD8+T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)值及CD4+/