KiSS-1和MMP-9在胃癌及其癌前病變中的表達(dá)與臨床病理意義.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名：至進(jìn)日期：如糾一分門中國(guó)醫(yī)科大

2、學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國(guó)醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借闋。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，以采用影印、縮印或其他手段保存論文論文作者

3、簽名：至建全指導(dǎo)教師簽名：圭童日期：移過程中的作用。材料與方法臨床病理資料：收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科手術(shù)切除胃癌標(biāo)本164例，其中同時(shí)收集配對(duì)164例正常胃粘膜，42例慢性萎縮性胃炎，93例腸上皮化生以及15例異型增生。標(biāo)本離體后盡快取材，lO％甲醛固定24h，取材組織厚4mln，常規(guī)組織處理、石蠟包埋，制成目標(biāo)蠟塊，做4岬組織切片，用于目標(biāo)組織定位。采用組織芯片制作儀將胃癌及其癌前病變以及配對(duì)正常胃粘膜等目標(biāo)組織構(gòu)建于組織

4、芯片蠟塊中，行4岬連續(xù)切片，備用。免疫組化染色與結(jié)果判定：用PV9000法檢測(cè)KiSS1及MMP9的表達(dá)情況。PV9000試劑盒購自北京中杉生物公司。KiSS1鼠抗人單克隆抗體(工作濃度1：300)購自美國(guó)Abnova公司，MMP9鼠抗人單克隆抗體(工作濃度：1：100)購自美國(guó)SantaCruz公司。采用檸檬酸修復(fù)液(pH6O)高壓修復(fù)抗原，PBS替代一抗做陰性對(duì)照。結(jié)果判定：KiSS1、MMP9免疫組化染色采用DAB顯色系統(tǒng)顯色，K

5、iSS1、MMP9蛋白陽性為棕黃色顆粒定位于細(xì)胞漿和／或細(xì)胞核。免疫組化結(jié)果由兩位觀察者采用盲法每個(gè)病例隨機(jī)選擇2個(gè)高倍視野，計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，按照陽性細(xì)胞數(shù)占同類細(xì)胞數(shù)的比例，進(jìn)行等級(jí)劃分。結(jié)果采用半定量計(jì)分方法，根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度㈧和染色細(xì)胞所占的比例(B)兩者乘積來判定。即：(A)：染色強(qiáng)度按下列標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定記分：0分為無色；1分為淺黃色；2分為棕黃色；3分為棕褐色(B)：染色的陽性細(xì)胞占比例按下列標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定記分：0分為陰性細(xì)胞或弱陽性細(xì)