骨質(zhì)疏松小鼠脂肪干細(xì)胞成骨能力的研究.pdf

1、目的:骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，OP)是一種系統(tǒng)性骨病，其發(fā)病機制是成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞在骨重塑過程中失衡，成骨細(xì)胞數(shù)量和活性降低，破骨細(xì)胞數(shù)量增加、功能活躍，導(dǎo)致骨吸收大于骨形成，造成骨質(zhì)疏松。大量研究證明脂肪干細(xì)胞(Adipose-derived stem cells，ASCs)具有向成骨細(xì)胞分化的潛能。骨質(zhì)疏松癥對脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特性以及成骨分化的影響尚未得到完整闡釋。本實驗通過對骨質(zhì)疏松癥小鼠和正常小鼠來源的兩組脂肪干

2、細(xì)胞成骨能力的比較，探討骨質(zhì)疏松癥對脂肪干細(xì)胞成骨分化的影響，從而為骨質(zhì)疏松癥患者自體脂肪干細(xì)胞移植，修復(fù)骨缺損奠定基礎(chǔ)。
　　方法:將雌性C57BL/6小鼠隨機分為實驗組（去勢組）和對照組（假手術(shù)組）。分別獲取兩組小鼠腹股溝處脂肪組織來源的脂肪干細(xì)胞，體外純化擴(kuò)增至第3代。對細(xì)胞進(jìn)行成骨方向誘導(dǎo)后，使用茜素紅染色法檢測脂肪干細(xì)胞的成骨能力及組間區(qū)別;實時熒光定量PCR、免疫熒光染色以及Western Blot檢測脂肪于細(xì)胞成骨相

3、關(guān)基因mRNA和成骨相關(guān)蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:茜素紅染色結(jié)果顯示，骨質(zhì)疏松來源的ASCs鈣鹽沉積明顯少于對照組，而real-time PCR和免疫熒光染色結(jié)果均指出，與對照組ASCs相比，實驗組的ASCs細(xì)胞內(nèi)成骨相關(guān)基因mRNAs的轉(zhuǎn)錄以及相關(guān)蛋白的表達(dá)量均顯著降低。以上結(jié)果表明，與對照組相比，去勢后的小鼠來源的脂肪干細(xì)胞成骨向分化能力降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.通過切除雌性小鼠雙側(cè)卵巢，成功構(gòu)建出骨質(zhì)疏松癥動