非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移腦脊液蛋白質(zhì)譜診斷模型的建立及其應(yīng)用.pdf

1、研究背景和目的：
　　 隨著多學(xué)科綜合治療的開(kāi)展，化療藥物和放療技術(shù)的進(jìn)步，非小細(xì)胞肺癌( non-small cell lung cancer，NSCLC)患者的生存期有所延長(zhǎng)，腦轉(zhuǎn)移的發(fā)生率也越來(lái)越高。目前腦轉(zhuǎn)移的診斷主要依靠影像學(xué)方法，如MRI和CT，對(duì)于影像學(xué)上沒(méi)有表現(xiàn)的腦部微小轉(zhuǎn)移病灶目前還沒(méi)有有效的診斷方法。腦部微小轉(zhuǎn)移病灶可能會(huì)分泌腫瘤相關(guān)蛋白到腦脊液中，通過(guò)檢測(cè)腦脊液中的腫瘤蛋白標(biāo)志物，有可能實(shí)現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移早期診斷的

2、目的。表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(surface-enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry，SELDI-TOF-MS)是近年發(fā)展起來(lái)的一種新的蛋白質(zhì)分離鑒定技術(shù)，它具有快速、簡(jiǎn)便、微量和高通量等特點(diǎn)，非常符合臨床體液蛋白質(zhì)組學(xué)研究的需要，被廣泛應(yīng)用于分離各種疾病相關(guān)的特異性標(biāo)志物。已有報(bào)道用SELDI技術(shù)通過(guò)檢測(cè)血清來(lái)診斷肺癌，檢

3、測(cè)腦脊液來(lái)診斷腦膠質(zhì)瘤，但目前還沒(méi)有報(bào)道采用SELDI技術(shù)檢測(cè)腦脊液來(lái)診斷NSCLC腦轉(zhuǎn)移。本研究的目的是通過(guò)分析NSCLC腦轉(zhuǎn)移患者、非腫瘤患者和早期NSCLC無(wú)腦轉(zhuǎn)移患者腦脊液的蛋白質(zhì)譜，找出差異蛋白峰，建立NSCLC腦轉(zhuǎn)移的蛋白質(zhì)潛診斷模型，為肺癌腦轉(zhuǎn)移的診斷提供新的方法。
　　 材料與方法：
　　 收集2007年3月2008年6月廣東省人民醫(yī)院住院患者的腦脊液標(biāo)本，其中NSCLC腦轉(zhuǎn)移患者腦脊液標(biāo)本29例，早期N

4、SCLC無(wú)腦轉(zhuǎn)移患者腦脊液標(biāo)本10例，非腫瘤患者腦脊液標(biāo)本23例。所有患者未行腦部和椎體放射治療和手術(shù)。采用美國(guó)Ciphergen Biosystems公司的CM10芯片和PBS II蛋白質(zhì)芯片閱讀機(jī)對(duì)腦脊液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)和數(shù)據(jù)讀取。采用Biomarker Wizard軟件統(tǒng)計(jì)分析3組標(biāo)本的蛋白質(zhì)峰，運(yùn)用Biomarker pattems軟件的決策樹(shù)模型進(jìn)行差異蛋白峰的比較和判別，建立分類(lèi)決策樹(shù)診斷模型。用由學(xué)習(xí)集建立的診斷模型對(duì)測(cè)試集進(jìn)

5、行盲法測(cè)試，評(píng)價(jià)其診斷和應(yīng)用價(jià)值。
　　 結(jié)果：
　　 1、肺癌腦轉(zhuǎn)移組和非腫瘤組之間有8個(gè)顯著差異性表達(dá)蛋白質(zhì)峰，有7個(gè)在腦轉(zhuǎn)移組中高表達(dá)，荷質(zhì)比( mass/charge，m/z)分別為：3400.41,4420.40，4966，32,6437.45，6634.73，8564.52,8693.23；有1個(gè)在腦轉(zhuǎn)移組中低表達(dá)，其m/z為4586.03。進(jìn)一步應(yīng)用數(shù)據(jù)建立分類(lèi)決策樹(shù)狀模型，發(fā)現(xiàn)只要一個(gè)m/z為6634.7

6、3蛋白質(zhì)峰就可以把兩組標(biāo)本分開(kāi)，在學(xué)習(xí)集中其靈敏度(sensitivity)為89.66％，特異度(specificity)為86.96％，總的診斷準(zhǔn)確率為88.46％，陽(yáng)性似然比6.87。
　　 2、肺癌腦轉(zhuǎn)移組與早期無(wú)腦轉(zhuǎn)移組有5個(gè)顯著差異性表達(dá)蛋白質(zhì)峰，在腦轉(zhuǎn)移組中都高表達(dá)，其m/z分別為：8698.00，6634.72,3400.40，4630.44，6427.96。運(yùn)用數(shù)據(jù)建立分類(lèi)決策樹(shù)狀模型，包括m/z為8698.0

7、0、1215.32和1245.70蛋白質(zhì)峰組成。在學(xué)習(xí)集中其靈敏度( sensitivity)為100.00％，特異度(specificity)為100.00％，總的診斷準(zhǔn)確率為100.00％。
　　 3、肺癌腦轉(zhuǎn)移組和非腫瘤組標(biāo)本各取10例進(jìn)行盲法測(cè)試。結(jié)果顯示其靈敏度( sensitivity)為80.00％，特異度(specificity)為70.00％，總的診斷準(zhǔn)確率為75.00％，陽(yáng)性似然比2.67。
　　 結(jié)