川芎防風(fēng)白芷方主成分組合研究.pdf

1、探索中藥復(fù)方有效物質(zhì)基礎(chǔ)——化學(xué)成分的配比與療效之間的相互關(guān)系，是中藥復(fù)方研究的一項重要基礎(chǔ)工作，也是中藥現(xiàn)代化的一項重要內(nèi)容?，F(xiàn)代中藥復(fù)方新藥研發(fā)的經(jīng)驗告訴我們，復(fù)方中的成分雖多，但是真正的藥效成分卻有限，而且往往是藥材中含量比較高的主成分?；诖耍谖墨I(xiàn)調(diào)研的基礎(chǔ)上，結(jié)合臨床實際，選取川芎、防風(fēng)、自芷組成一個治療偏頭痛的小復(fù)方，作為研究范例，進(jìn)行每味藥的主要成分分析和成分組合藥理活性評價，為研發(fā)“質(zhì)量可控，低毒高效”、符合現(xiàn)代需求的

2、創(chuàng)新中藥，探索新模式。 本論文共分為兩部分。 第一章文獻(xiàn)研究1．本章我們首先對川芎防風(fēng)白芷方的組成進(jìn)行了古代文獻(xiàn)的研究。根據(jù)對治療頭痛古代方劑的統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)川芎、白芷、防風(fēng)在歷代方劑中出現(xiàn)的頻率均位居前列，且為治療頭痛的常用藥隊。三者配伍具有氣血并調(diào)、善止疼痛的作用特點(diǎn)，十分切合偏頭痛“氣血逆亂、絡(luò)脈失和”的病機(jī)關(guān)鍵，也充分體現(xiàn)了偏頭痛“調(diào)暢氣血、和絡(luò)止痛”的治療大法。因此，不僅可以把川芎-防風(fēng)白芷復(fù)方看成芷芎散和防風(fēng)白芷

3、丸的合方，而且有理由相信三味藥配伍具有確切的治療偏頭痛的效果。 2．從中西醫(yī)不同角度對偏頭痛的致病原因及發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了綜合分析，總結(jié)了目前中西醫(yī)臨床上常用的偏頭痛防治藥物。 3．對復(fù)方中每味中藥進(jìn)行了化學(xué)、分析、藥理等方面的文獻(xiàn)研究。明確了各味藥中化學(xué)成分的種類及其主要化學(xué)成分，同時，總結(jié)了各主要成分與抗偏頭痛相關(guān)的藥理作用。 第二章川芎防風(fēng)白芷方的成分組合研究1．通過對近年來川芎、防風(fēng)、白芷化學(xué)成分和藥理作用的

4、文獻(xiàn)研究，以及本課題組以往的研究基礎(chǔ)，證實成分A等不僅是飲片中的主要成分，而且各成分均具有一定的藥理作用，是飲片中的主要有效成分。因此將其作為復(fù)方成分組合的研究對象。 2．以溶劑法對川芎、防風(fēng)、白芷進(jìn)行化學(xué)成分的提取，通過硅膠、ODS柱色譜分離，利用質(zhì)譜、核磁共振等現(xiàn)代波譜技術(shù)鑒定化合物結(jié)構(gòu)，得到了以成分A、B、C等主的化合物。 3．運(yùn)用HPLC法對主要成分進(jìn)行了含量測定方法學(xué)考察，建立了各主成分的含量測定方法，確定了各主成分在

5、飲片中的平均含量。 4．根據(jù)復(fù)方的治療原則以及著名中醫(yī)藥學(xué)家王永炎院士多年臨床經(jīng)驗，設(shè)定了方劑的飲片配比方案，即川芎．防風(fēng)．白芷(X：Y：Z)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合飲片中各主成分的平均含量，確定了成分組合樣品中各成分的比例，并制備了主成分組合樣品。 5．以離體血管舒縮功能為模型，首先以大鼠為實驗動物，進(jìn)行了對抗KCI所致大鼠離體胸主動脈收縮的實驗研究。結(jié)果表明，各單體成分均具有不同程度地對抗KCI所致大鼠離體胸主動脈收縮作的

6、作用，并呈現(xiàn)劑量-反應(yīng)關(guān)系。另外，主成分組合樣品也同樣具有對抗KCl所致大鼠離體胸主動脈收縮的作用，其作用強(qiáng)度明顯高于成分G以外的6個單體成分。 6．在大鼠離體血管實驗的基礎(chǔ)上，我們又進(jìn)行了各單體成分對抗KCl所致的家兔離體腦基底動脈收縮實驗。結(jié)果顯示，除成分A、B外的其他5個單體成分均具有不同程度的對抗KCl所致的家兔離體腦基底動脈收縮作用。由于在大鼠實驗中，主成分組合樣品所體現(xiàn)的舒張血管作用比成分G弱。針對這一結(jié)果，我們調(diào)整

7、了成分G在組合樣品中的比例，制備成另一成分組合樣品P2，與P1樣品進(jìn)行家兔離體腦血管的實驗比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩個成分組合樣品均具有較好的對抗KCI所致的家兔離體腦基底動脈收縮作用，而且作用濃度范圍接近。同時，還發(fā)現(xiàn)P2的EC<,50>僅為13.39μg·ml-1，不僅低于P1(21.94 μg·ml-1)，而且大大低于所有單體成分。說明成分組合舒張血管的作用不僅顯著優(yōu)于單體成分，而且通過調(diào)整成分組合樣品中各單體成分的比例，還可能改變成分組

8、合樣品的作用途徑，從而影響成分組合樣品的血管活性。 7．另外，我們還對主成分組合樣品進(jìn)行了對抗5-HT所致家兔離體腦基底動脈收縮的實驗研究。結(jié)果顯示，P1和P2的最大舒張率均接近100％，比較EC<,50>P2

9、有進(jìn)一步優(yōu)化的可能，而且這對我們進(jìn)一步研究成分組合的血管活性機(jī)制也具有重要的意義?？傊?，通過本論文的研究工作，不僅明確了各單體成分的血管活性，而且進(jìn)一步明確了主成分組合的血管活性，以及與各單體成分在血管活性方面的關(guān)系。不僅為川芎防風(fēng)白芷方治療偏頭痛提供了現(xiàn)代理論依據(jù)，同時也為我們進(jìn)一步的研究工作打下了堅實的基礎(chǔ)。本論文以成分組合為切入點(diǎn)，研究復(fù)方的有效物質(zhì)基礎(chǔ)，也為中藥復(fù)方研究提供了一條新的思路，對于中藥現(xiàn)代化具有理論意義和現(xiàn)實指導(dǎo)意義