通心絡(luò)超微粉對(duì)大鼠內(nèi)皮損傷合并微血栓形成（絡(luò)脈瘀阻）的防治作用.pdf

1、心血管疾病是一類嚴(yán)重危害人類健康、影響生活質(zhì)量的常見病。高同型半胱氨酸血癥是心血管疾病的一個(gè)新的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，其對(duì)血管內(nèi)皮造成的損傷受到廣泛關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)通過建立內(nèi)皮損傷合并微血栓形成(絡(luò)脈瘀阻)的大鼠模型，探討通心絡(luò)超微粉在阻止微血栓的形成，保護(hù)血管內(nèi)皮和改善微循環(huán)障礙中的作用。 一、喂飼蛋氨酸后不同時(shí)間血漿同型半胱氨酸水平及內(nèi)皮功能的測(cè)定 雄性SPF級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為正常組(Control組)、高同型半胱氨酸組(HHc

2、y組)。HHcy組每天蛋氨酸灌胃1g/kg，琥珀?；前粪邕?succinylsulfathiazole，SST)0.5 g/kg加入飲水中，連續(xù)4周。正常組予以等量純水灌胃，飲水中不加SST。兩組均于灌胃2、3、4周分別心臟采血，熒光免疫法檢測(cè)血漿同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)水平、硝酸還原酶法測(cè)定血漿NO值、酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法測(cè)定血管性假血友病因子(von willebrand factor，vwF)，以觀測(cè)喂

3、飼蛋氨酸后不同時(shí)間血漿同型半胱氨酸水平及內(nèi)皮功能。結(jié)果表明，喂飼蛋氨酸4周可造成顯著的血管內(nèi)皮損傷。 二、大鼠內(nèi)皮損傷對(duì)血管舒張功能的影響及通心絡(luò)超微粉保護(hù)血管內(nèi)皮作用的研究 雄性SPF級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為正常組(Control組)、高同型半胱氨酸組(HHcy組)和通心絡(luò)組(TXL組)。HHcy組和TXL組均以蛋氨酸lg/kg灌胃，SST0.5 g/kg加入飲水，持續(xù)4周。正常組予以等量純水灌胃對(duì)照處理。TXL組于蛋氨酸灌

4、胃第4周開始加服通心絡(luò)0.4g/kg，持續(xù)7天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束進(jìn)行離體主動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)，觀測(cè)內(nèi)皮依賴性血管舒張功能及非內(nèi)皮依賴性舒張功能的變化，同時(shí)檢測(cè)血漿Hcy、NO、vWF值。結(jié)果表明血漿同型半胱氨酸水平升高能造成大鼠內(nèi)皮損傷/功能障礙。通心絡(luò)可以改善內(nèi)皮依賴性血管舒張功能，起到保護(hù)血管內(nèi)皮的作用，但其機(jī)制并不是通過降低血漿Hcy水平。 三、角叉菜膠/脂多糖聯(lián)合造成大鼠體內(nèi)微血栓形成模型的建立 雄性SPF級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為正常

5、組(C0ntrol組)和微血栓形成組(LPS組)。LPS組腹腔注射角叉菜膠10mg/kg，16小時(shí)后再腹腔注射脂多糖0.2mg/kg。正常組腹腔注射等量生理鹽水對(duì)照處理。注射LPS 20小時(shí)后，兩組均心臟采血檢測(cè)凝血指標(biāo)、血小板計(jì)數(shù)，鏡下觀測(cè)腸系膜微循環(huán)。注射LPS 24小時(shí)后結(jié)束實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)血漿VWF和血漿NO。結(jié)果顯示LPS組大鼠于注射LPS 24小時(shí)后體內(nèi)有廣泛微血栓形成，血液處于高凝期。 四、血管內(nèi)皮損傷合并微血栓形成(絡(luò)

6、脈瘀阻)動(dòng)物模型的建立及通心絡(luò)超微粉的防治作用 雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組(Control組)、內(nèi)皮損傷合并微血栓形成組(HL組)、內(nèi)皮損傷合并微血栓形成灌服通心絡(luò)組(HTL組)。HL組和HTL組每天蛋氨酸灌胃1g/kg，SST 0.5 g/kg加入飲水中，正常組灌服等量純水對(duì)照，飲水中不加SST，連續(xù)4周，HTL組于蛋氨酸灌胃第4周開始加服通心絡(luò)0.4g/kg，持續(xù)7天。4周后，HL組和HTL組均腹腔注射角又菜膠10mg/kg

7、，16小時(shí)后再腹腔注射脂多糖0.2mg/kg。于注射角叉菜膠前和注射脂多糖20小時(shí)后分別檢測(cè)凝血功能，注射脂多糖20小時(shí)后檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)，鏡下觀測(cè)腸系膜微循環(huán)；24小時(shí)后結(jié)束實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)NO、vWF和血液流變指標(biāo)。結(jié)果不但表明內(nèi)皮損傷聯(lián)合交叉菜膠(Carrageena，n，Ca)/脂多糖(lipopolySaCCharide，LPS)模型(絡(luò)脈瘀阻模型)成功建立，更進(jìn)一步證明了內(nèi)皮損傷是體內(nèi)微血栓形成的促進(jìn)因素。并且證明了通心絡(luò)超微粉可以

8、有效阻止微血栓的形成，起到保護(hù)血管內(nèi)皮和改善微循環(huán)障礙的作用。 結(jié)論： 1．本實(shí)驗(yàn)條件下，喂飼蛋氨酸(1g/kg，4周)引起高同型半胱氨酸血癥，造成顯著的血管內(nèi)皮損傷。 2．建立大鼠高同型半胱氨酸血癥模型，進(jìn)一步完善了各項(xiàng)確定內(nèi)皮損傷的檢測(cè)指標(biāo)，并且證實(shí)了通心絡(luò)超微粉對(duì)內(nèi)皮損傷/功能障礙具有良好的防治作用。 3．建立了角叉菜膠/脂多糖聯(lián)合造成大鼠體內(nèi)廣泛微血栓形成模型。 4．通過血管內(nèi)皮損傷合并微