一種轉(zhuǎn)基因細(xì)胞水平暫態(tài)表達(dá)方法的初步確立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、首先利用脂質(zhì)體將構(gòu)建好的攜hGH基因的乳腺特異性表達(dá)載體pLNCX-βLG-hGH轉(zhuǎn)染小鼠胚成纖維細(xì)胞,轉(zhuǎn)染3天后,G418篩選8天,挑取陽性克隆移入24孔板培養(yǎng),長滿后移入培養(yǎng)瓶中.進(jìn)行細(xì)胞染色體DNA的提取與鑒定,證實(shí)已轉(zhuǎn)入hGH基因.取此細(xì)胞與5-10倍的人乳腺癌敏感細(xì)胞株MCF-7/S在50﹪PEG作用下融合,融合后培養(yǎng)1-2天,放射免疫分析方法檢測(cè)轉(zhuǎn)hGH基因細(xì)胞的暫態(tài)表達(dá)情況,測(cè)雜種細(xì)胞培養(yǎng)液中hGH水平.結(jié)論:經(jīng)統(tǒng)計(jì),雜種

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