變應(yīng)原低聚體及其ISS-ODN偶聯(lián)復(fù)合物的功能研究.pdf

1、背景及目的: 變應(yīng)性疾病的特異性免疫治療(SIT)已成為變應(yīng)性疾病治療的重要方法，這種治療方法可以改變變應(yīng)性疾病病程，阻止癥狀的惡化和防治對新的變應(yīng)原產(chǎn)生過敏，故被認(rèn)為是目前唯一病因治療方法，也是一種病因預(yù)防手段。在傳統(tǒng)的特異性免疫治療中，天然變應(yīng)原提取物的應(yīng)用存在諸多隱患。首先，應(yīng)用于特異性變應(yīng)原免疫治療的天然提取物中存在其它非致敏蛋白和大分子，從而使應(yīng)用時的計量很難標(biāo)準(zhǔn)化；其次，所獲得的天然變應(yīng)原有較強的致敏性，在治療的過程

2、中存在一定的危險。由于以上兩種情況的存在使得臨床應(yīng)用的劑量很低，很難達到免疫治療的效果。此外，治療的時間長達3～5年并且療效不確切，影響了患者治療的依從性。 因此需要一種新的免疫治療方法來克服上述不足，縮短治療時間，提高臨床效果。國外對此進行的大量研究，主要集中在：變應(yīng)原的遺傳改良即獲得低變應(yīng)原性變應(yīng)原)。目前獲得低變應(yīng)原性變應(yīng)原的方法有：變應(yīng)原低聚體法、ISS-ODN-偶聯(lián)變應(yīng)原(ISS-ODN)法等。特別是ISS-ODN-偶

3、聯(lián)變應(yīng)原法，在基因治療的安全性受到挑戰(zhàn)的今天，顯示了更為廣闊的應(yīng)用前景。 近年來對變應(yīng)原低聚體和ISS-ODN-偶聯(lián)變應(yīng)原的研究已經(jīng)取得了很大進展，但對變應(yīng)原低聚體與ISS-ODN-偶聯(lián)變應(yīng)原低聚體整合后的復(fù)合體功能的研究尚不多見，構(gòu)建了變應(yīng)原低聚體Monomer、Dimer、Trimer及ISS-ODN偶聯(lián)變應(yīng)原低聚體的整合后的復(fù)合體。預(yù)期這種新的復(fù)合物的免疫治療效果將會更好，而其安全性將得到進一步提高。這將為變應(yīng)原低變應(yīng)原性

4、的遺傳改良提供新的方向。 方法: 1．研究對象：變應(yīng)性鼻炎(AR)患者：均為臨床確診的變應(yīng)性鼻炎患者(符合?？跇?biāo)準(zhǔn))。對照組：健康志愿者，經(jīng)問診無變應(yīng)性疾病史。 2．人外周血單個核細(xì)胞(PBMC)的提取(Ficoll密度梯度離心法)。 3．變應(yīng)原低聚體Monomer，Dimer，Trimer三個蛋白的表達與純化。 4．ISS-ODN的合成。 5．ISS-ODN-偶聯(lián)Monomer，ISS-