殼聚糖誘導(dǎo)煙草抗病機(jī)理研究.pdf

1、1.以9種植物病原真菌為試驗(yàn)材料，利用PDA為培養(yǎng)基，研究了離體條件下不同濃度的殼聚糖處理對(duì)植物病原真菌的抑制活性和抑菌作用的持效時(shí)間。結(jié)果表明，殼聚糖對(duì)9種植物病原真菌的菌落形態(tài)、菌絲生長(zhǎng)和繁殖等均有一定的影響。當(dāng)殼聚糖濃度≥2.0g/L時(shí)，除葡萄炭疽病菌(Colletotrichumgloeospotioides)外，其他8種植物病原真菌的生長(zhǎng)都受到了顯著抑制(p＜0.05)；在0.75g/L～5.0g/L的濃度范圍內(nèi)，濃度越高抑菌

2、效果越明顯，但抑菌強(qiáng)弱與濃度不成正比；而濃度≤0.75g/L時(shí)對(duì)葡萄炭疽病菌的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。高濃度殼聚糖抑菌持效期長(zhǎng)，抑菌率下降慢。9種真菌的最低抑菌濃度(minimuminhibitoryconcentration，MIC)從3.0g/L到≥5.0g/L。殼聚糖對(duì)植物病原真菌抑制活性受濃度、時(shí)間和病原真菌種類等因素影響。 2.煙草黑脛病菌(Phytophthoraparasiticavarnicotianae，Ppn)是嚴(yán)

3、重危害煙草生產(chǎn)的一種致病真菌，試驗(yàn)中以Ppn為材料，探討了4種不同分子量的殼聚糖在不同濃度和pH時(shí)對(duì)Ppn的菌落、菌絲的形態(tài)結(jié)構(gòu)和菌絲生長(zhǎng)的影響，以及對(duì)孢子萌發(fā)的抑制作用。在殼聚糖處理后Ppn菌絲出現(xiàn)畸變，正常的新陳代謝和細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)受到明顯影響和破壞。在低濃度下(≤0.625mg/L)，殼聚糖抑菌效果隨分子量增大而增強(qiáng)；分子量越小受濃度影響越大，濃度≥5.0mg/L時(shí)，分子量為4.7×104的殼聚糖抑菌效果最強(qiáng)。除分子量為5.0×103

4、的殼聚糖外，其它分子量較大的殼聚糖受pH影響明顯。殼聚糖分子量不同，其抑菌主要機(jī)理可能也不同，濃度、pH和分子量是殼聚糖抑菌活性的重要影響因素。 3.配制四種殼聚糖溶液，直接噴灑到對(duì)煙草黑脛病易感和具有抗性的兩種煙草的葉片上，觀測(cè)其對(duì)煙草葉片中POD、PAL兩種抗病相關(guān)酶的活性的誘導(dǎo)，同時(shí)作了POD的同工酶分析。殼聚糖誘導(dǎo)后兩種煙草的POD、PAL在96h內(nèi)均出現(xiàn)酶活性高峰。出現(xiàn)時(shí)間和強(qiáng)弱在兩種煙草中不同，抗病性的中煙100活性

5、較高。同工酶電泳也發(fā)現(xiàn)4條同工酶帶染色均加深，但并沒(méi)又發(fā)現(xiàn)新的酶帶和不同品種的特征性酶帶。同時(shí)，病菌Ppn感染也激發(fā)了煙草葉片中兩種酶活性的升高，但都只有一個(gè)酶活性峰。殼聚糖能夠誘導(dǎo)煙草抗病能力的升高，誘導(dǎo)強(qiáng)度與濃度、分子量有關(guān)，整體上CS1誘導(dǎo)效應(yīng)產(chǎn)生更快一些。 4.采用SDS電泳和紅外光譜分析了殼聚糖對(duì)Ppn和兩種煙草可溶性蛋白和化合物合成的影響?？傮w上，殼聚糖抑制Ppn中蛋白的合成，而對(duì)煙草的蛋白具有激發(fā)活性，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)蛋

6、白帶的缺失或增加。紅外光譜分析發(fā)現(xiàn)光譜吸收峰與殼聚糖分子量有關(guān)，接菌處理也能促使部分峰的升高，但與殼聚糖處理有差別。沒(méi)有蛋白帶和光譜吸收峰的出現(xiàn)或消失，主要是量的增加或減少，說(shuō)明殼聚糖誘導(dǎo)煙草抗病和抑制Ppn生長(zhǎng)是系統(tǒng)性的復(fù)雜反應(yīng)。 5.直接將殼聚糖噴灑到煙草上，測(cè)定相對(duì)電導(dǎo)率和煙草病情指數(shù)變化。殼聚糖能夠降低煙草葉片的相對(duì)電導(dǎo)率，增強(qiáng)煙草的抗逆能力。能夠誘導(dǎo)煙草抗病能力的提高，對(duì)紅花大金元和中煙100誘導(dǎo)防效分別在72h、48