寶光風(fēng)濕液對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本研究對(duì)已上市品種寶光風(fēng)濕液進(jìn)行擬增加膝骨關(guān)節(jié)炎新適應(yīng)癥的二次開(kāi)發(fā)，通過(guò)抗炎、鎮(zhèn)痛、膝骨關(guān)節(jié)炎等動(dòng)物模型，觀察寶光風(fēng)濕液對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎的影響并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法:1、抗炎作用研究:采用二甲苯致小鼠耳腫脹模型檢測(cè)小鼠耳腫脹度;采用雞蛋清致大鼠足爪腫脹模型檢測(cè)大鼠足爪腫脹度;采用小鼠棉球肉芽腫模型測(cè)量小鼠棉球肉芽干重。2、鎮(zhèn)痛作用研究:采用冰醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)觀察小鼠扭體次數(shù);采用小鼠熱板疼痛模型觀察小鼠痛閾值。3、對(duì)

2、膝骨關(guān)節(jié)炎模型作用的研究:①采用前交叉韌帶切除法復(fù)制兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型，肉眼觀察膝關(guān)節(jié)滑膜、滑液、軟骨大體形態(tài)變化，光鏡下觀察關(guān)節(jié)滑膜經(jīng)HE染色后的病理形態(tài)變化，并用ELISA法檢測(cè)兔關(guān)節(jié)液中基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP-1）的含量及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;②采用膝關(guān)節(jié)腔注射木瓜蛋白酶復(fù)制大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型，肉眼觀察膝關(guān)節(jié)滑膜、滑液、軟骨大體形態(tài)變化，光鏡下觀察關(guān)節(jié)軟骨、滑膜經(jīng)HE染色及甲苯胺藍(lán)染色后的病理形

3、態(tài)變化，并用ELISA法檢測(cè)大鼠關(guān)節(jié)液中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素1β（IL-1β）、基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-3（MMP-3）的含量。
　　結(jié)果:1、與蒸餾水模型組比較:寶光風(fēng)濕液0.35g（原生藥）/kg、0.70g（原生藥）/kg劑量組能明顯降低小鼠耳腫脹度;寶光風(fēng)濕液0.14g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg、0.56 g（原生藥）/kg劑量組在雞蛋清致炎后1h能明顯降低大鼠足

4、爪腫脹度，寶光風(fēng)濕液0.28g（原生藥）/kg、0.56 g（原生藥）/kg劑量組分別在雞蛋清致炎后2h、3h能明顯降低大鼠足爪腫脹度，寶光風(fēng)濕液0.28g（原生藥）/kg劑量組在雞蛋清致炎后4h能明顯降低大鼠足爪腫脹度;寶光風(fēng)濕液0.35g（原生藥）/kg、0.70g（原生藥）/kg劑量組能明顯降低小鼠棉球肉芽干重。2、與蒸餾水模型組比較:寶光風(fēng)濕液0.17 g（原生藥）/kg、0.35g（原生藥）/kg、0.70g（原生藥）/kg劑

5、量組能明顯降低小鼠扭體次數(shù);寶光風(fēng)濕液0.35g（原生藥）/kg劑量組在給藥后60分鐘能明顯降低小鼠的痛閾值。3、①在前交叉韌帶切除法致兔膝骨關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)中，與蒸餾水模型組比較:肉眼大體觀察，寶光風(fēng)濕液0.07g（原生藥）/kg、0.14g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg劑量組膝關(guān)節(jié)滑膜、滑液、軟骨的形態(tài)均有不同程度改善;光鏡下觀察，寶光風(fēng)濕液0.07g（原生藥）/kg、0.14g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg劑

6、量組均能不同程度減輕膝關(guān)節(jié)滑膜組織病理學(xué)改變;寶光風(fēng)濕液0.07g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg劑量組MMP-1含量明顯降低。②在木瓜蛋白酶致大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)中，與蒸餾水模型組比較:肉眼大致觀察，寶光風(fēng)濕液0.14g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg、0.56g（原生藥）/kg劑量組膝關(guān)節(jié)滑膜、滑液、軟骨的形態(tài)均有不同程度改善;光鏡下觀察，寶光風(fēng)濕液0.14g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg、0.5

7、6g（原生藥）/kg劑量組均能不同程度減輕膝關(guān)節(jié)軟骨和滑膜組織病理學(xué)改變;寶光風(fēng)濕液0.14g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg、0.56g（原生藥）/kg劑量組TNF-α含量明顯降低，0.28g（原生藥）/kg、0.56g（原生藥）/kg劑量組IL-1β、MMP-3含量明顯降低，0.14g（原生藥）/kg、0.28g（原生藥）/kg劑量組MMP-1含量明顯降低。
　　結(jié)論:寶光風(fēng)濕液具有一定的抗炎、鎮(zhèn)痛作用，可以改善木