OPN、c-met及ras在喉鱗癌中的表達(dá)意義及其相關(guān)性研究.pdf

1、　　目的：
　　喉癌是頭頸部常見(jiàn)的惡性腫瘤,占全身惡性腫瘤的 1%-5%,占耳鼻咽喉科惡性腫瘤的11%-2 2%。病理上以鱗狀細(xì)胞癌多見(jiàn)。近年來(lái)因其環(huán)境污染加重,喉癌發(fā)病率有逐漸增高的趨勢(shì),嚴(yán)重的威脅著人民的身體健康。隨著腫瘤分子機(jī)制的研究進(jìn)展,尋找喉癌的分子標(biāo)志物,研究喉癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移規(guī)律和喉癌的基因治療已成為臨床研究的熱點(diǎn)。骨橋蛋白(osteopontin,OPN)是一種具有多種功能分泌型鈣結(jié)合磷酸化糖蛋白,它能與骨

2、組織中的羥磷灰石緊密結(jié)合,參與調(diào)節(jié)骨鈣的沉積。然而,有研究表明, OPN 是一種和腫瘤有關(guān)的鈣結(jié)合磷酸化糖蛋白,在多種腫瘤的致癌潛能中起重要作用[4]。盡管 OPN的主要生理功能已基本明確,但在喉癌發(fā)生發(fā)展中的作用和分子調(diào)節(jié)機(jī)制尚不完全清楚。另有研究表明 c-met 和 ras與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。本研究旨在從蛋白水平觀察 OPN、c-met及ras在喉癌組織及癌旁組織中三種蛋白的表達(dá)情況,以期探討三者在喉癌中的表達(dá)意義及三者的相

3、關(guān)性,為進(jìn)一步深入研究喉癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制及腫瘤治療提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　42 例喉鱗癌標(biāo)本作為研究對(duì)象,所有病例臨床資料完整且均為首次確診,術(shù)前未接受化療或放療,術(shù)后經(jīng)病理確診為喉鱗癌。另取癌旁正常組織和聲帶息肉 25例作為對(duì)照組。采用免疫組化技術(shù) MaxVision法,按照 MaxVision免疫組化系列工作液試劑盒提供的步驟進(jìn)行操作,檢測(cè)所有標(biāo)本中 OPN、c-met和 ras的表達(dá)水平,比較三者在實(shí)驗(yàn)

4、組和對(duì)照組中表達(dá)的差異性及實(shí)驗(yàn)組中三者與主要臨床病理指標(biāo)間的關(guān)系,并對(duì) OPN、c-met和ras的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。采用應(yīng)用SPSS17.0版統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：
　　1. OPN在喉鱗癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為54.8%,在對(duì)照組中陽(yáng)性表達(dá)率24%,兩者比較有顯著性差異(P=0.014)；在T1、T2期喉癌中的OPN陽(yáng)性表達(dá)率(35.0%)明顯低于T3、T4期喉癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為(72.7%),兩組

5、有明顯差異(P=0.014)；OPN在高、中、低分化喉鱗癌中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為 36.4%、71.4%、83.3%,三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.038)；OPN 在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為86.7%,在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為 37.0%,兩組間有明顯差異(P=0.002)。OPN在不同年齡組和臨床分期間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.c-met 在喉鱗癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為 64.3%,而在 25 例癌旁組織或聲帶息肉的表達(dá)率

6、為32.0%,兩組間的陽(yáng)性表達(dá)率有顯著性差異(P =0.011)；T3、T4期喉癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為 81.8%,而在 T1、T2 期喉癌中的 c-met 陽(yáng)性表達(dá)率為45.0%,兩組有顯著性差異(P=0.013)；在高、中、低分化喉鱗癌中c-met的陽(yáng)性表達(dá)率分別為 45.5%、78.6%、100.0%,三組間有顯著性差異(P=0.020)；c-met在LSCC中的Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期的陽(yáng)性表達(dá)率為分別為38.5%、75.9%,兩組間有差

7、異(P=0.047)；c-met在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為86.7%,在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為51.9%,兩組間有顯著性差異(P=0.024)。c-met在不同的年齡組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.ras在 LSCC中的陽(yáng)性表達(dá)率為73.8%,而在25例癌旁組織或聲帶息肉的表達(dá)率為 48.0%,兩組間的陽(yáng)性表達(dá)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.033),ras 在Ⅰ與Ⅱ期LSCC中的陽(yáng)性表達(dá)率為46.2%,在Ⅲ與Ⅳ期LSCC中的陽(yáng)

8、性表達(dá)率為86.2%,兩組間有顯著性差異( P=0.019 )； ras 在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為100.0%,在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為 59.3%,兩組間有顯著性差異(P=0.012)。ras在不同的年齡組、T分期及分化程度間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.應(yīng)用 Spearman 等級(jí)統(tǒng)計(jì)分析,喉癌中 OPN 的陽(yáng)性表達(dá)與 c-met、ras 的陽(yáng)性表達(dá)分別呈正相關(guān)(rs=0.321,P=0.038； rs=0.329,

9、P=0.033)；c-met的陽(yáng)性表達(dá)與ras的陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.347,P=0.024)。
　　結(jié)論：
　　1.OPN、c-met、ras在喉鱗癌組織中的表達(dá)率顯著高于癌旁組織或聲帶息肉組織,表明OPN、c-met、ras在喉鱗癌組織中存在高表達(dá),提示三者是喉鱗癌發(fā)生、發(fā)展中的常見(jiàn)的分子事件。
　　2.OPN 蛋白陽(yáng)性表達(dá)與喉鱗癌組織分化程度、T 分期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)。OPN 蛋白的陽(yáng)性

10、表達(dá)隨著 T 分期的進(jìn)展而升高,隨著癌組織分化程度的升高而降低,且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。說(shuō)明該基因的高表達(dá)在喉癌的發(fā)生發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起到重要作用。
　　3.c-met蛋白表達(dá)與喉鱗癌T分期、組織分化程度、臨床分期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。隨著T分期與臨床分期的進(jìn)展c-met蛋白陽(yáng)性表達(dá)呈上升趨勢(shì),而喉鱗癌組織分化程度越高,c-met蛋白的陽(yáng)性表達(dá)越低,且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。說(shuō)明該基因的高表

11、達(dá)在喉癌的發(fā)生發(fā)展及浸潤(rùn)中發(fā)揮著重要作用。
　　4.ras 蛋白表達(dá)與喉鱗癌臨床分期和有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。ras 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)隨著臨床分期的進(jìn)展呈上升趨勢(shì)且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。說(shuō)明該基因的激活可能是喉鱗癌發(fā)病機(jī)制之一。
　　5.在喉鱗癌中,OPN陽(yáng)性表達(dá)與c-met陽(yáng)性表達(dá)和ras陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān),c-met 陽(yáng)性表達(dá)和ras陽(yáng)性表達(dá)也呈正相關(guān),表明三者之間有密切的關(guān)系,提示三有可能共同促進(jìn)了