加工方法對半夏質(zhì)量的影響及不同葉型半夏遺傳多樣性與其品質(zhì)的初步研究.pdf

1、半夏來源于天南星科植物半夏Pinellia ternata（Thunb.）breit.的干燥塊莖，辛、溫，有小毒，具有燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結(jié)之功效[1]。半夏是一種適應(yīng)性很強的雜草性植物，在我國大部分省區(qū)均有分布。
　　課題組對主產(chǎn)區(qū)四川、貴州、甘肅半夏生產(chǎn)情況進(jìn)行了實地考察，了解不同產(chǎn)區(qū)半夏的生長環(huán)境、變異情況及藥材初加工方法。通過考察發(fā)現(xiàn)，生長在不同環(huán)境甚至同一環(huán)境下的居群間都存在變異，主要體現(xiàn)在半夏植株的葉形和珠芽上。

2、另外，半夏產(chǎn)地初加工方法多為去皮-熏硫-干燥，熏硫處理后的半夏色澤好，易干燥、易儲藏、防蟲，熏硫不當(dāng)除對半夏的化學(xué)成分產(chǎn)生了影響外，還導(dǎo)致外源性有毒物質(zhì)二氧化硫的殘留超標(biāo)，影響半夏的臨床療效。針對以上情況，本課題進(jìn)行了半夏產(chǎn)地初加工方法和不同葉型半夏遺傳多樣性與品質(zhì)的初步研究，研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1．半夏產(chǎn)地初加工研究
　?。?）本課題對半夏進(jìn)行了烘干、曬干、真空冷凍干燥、減壓干燥、遠(yuǎn)紅外干燥、熏硫處理等6種方法的研究

3、，將其加工品與購買的2批商品半夏（熏硫）從藥材的外觀性狀、折干率、總酸及總生物堿含量、浸出物、總灰分及酸不溶性灰分等方面進(jìn)行評價。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，烘干、曬干、真空冷凍干燥、減壓干燥、遠(yuǎn)紅外干燥的半夏在外觀性狀上差異較大，以曬干最好；其浸出物、總酸含量間無顯著性差異；除真空冷凍干燥外，其余4種方法對半夏總生物堿含量影響不大；熏硫?qū)Π胂牡慕鑫?、總生物堿、總酸含量均有顯著影響。通過加權(quán)評分法對不同加工方法的半夏藥材進(jìn)行了評價，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以曬干半夏

4、的評分最高，其次是減壓干燥，熏硫處理的評分較低。
　?。?）在上述研究的基礎(chǔ)上，對半夏不同熏硫時間及熏硫后不同的干燥方法進(jìn)行了研究，通過對半夏中二氧化硫殘留量的測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，半夏中的二氧化硫殘留量隨著熏硫時間的延長而增加，且在熏硫時間>b h以后，二氧化硫殘留量超過了150mg/kg；另外，熏硫?qū)Π胂闹械幕瘜W(xué)成分也有了一定的影響，總生物堿含量與熏硫時間的變化規(guī)律不明顯，總酸含量隨熏硫時間的升高有增加的趨勢；不同干燥方法對半夏中二

5、氧化硫的殘留量也存在影響，以熏后曬干處理的二氧化硫殘留量最低。
　?。?）對半夏HPLC指紋圖譜進(jìn)行了系統(tǒng)研究，分別建立了熏硫與無硫半夏的HPLC指紋圖譜共有模式，并對熏硫與未熏硫半夏的HPLC指紋圖譜作了比較分析。通過對指紋圖譜的相似度分析表明，熏硫時間在 bh以內(nèi)的圖譜與未熏硫半夏圖譜相似，熏硫時間大于 bh后，與未熏硫半夏圖譜相似度較低。
　　結(jié)合熏硫前后半夏藥材性狀特征、化學(xué)成分變化及二氧化硫殘留量進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，熏硫

6、時間小于bh時，半夏中化學(xué)成分雖有一定的變化，但無顯著性差異，且二氧化硫殘留量不超過國家規(guī)定的150mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)，因此將半夏最佳加工方法確定為：以直接曬干最好，在某些陽光不充足的地區(qū)，半夏采挖后無法曬干時，可以適當(dāng)?shù)倪M(jìn)行熏硫處理，但是熏硫時間不得超過b h，該方法已申請專利1項。
　　2.對半夏種內(nèi)變異情況進(jìn)行了部分生物學(xué)特性、生長規(guī)律、細(xì)胞學(xué)、藥材質(zhì)量等方面的初步研究，主要內(nèi)容有：
　?。?）通過對半夏主葉長、主葉寬、

7、珠芽位置（珠芽至塊莖的長度）、地上部分（地上部分莖的長度）、株高、珠芽直徑、塊莖直徑等進(jìn)行測定和統(tǒng)計分析顯示，半夏表型特征存在普遍的變異，其中葉形狀的變異最為明顯，按照葉形的不同將半夏分為芍藥葉型、桃葉型、竹葉型、柳葉型4種，其中芍藥葉型占的比例較大；其次是珠芽的著生位置、數(shù)量和塊莖形狀。
　?。?）對4種葉型半夏的生長節(jié)律進(jìn)行了觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除桃葉型半夏的珠芽發(fā)生時間略早外，芍藥葉型半夏和桃葉型半夏的生長規(guī)律都比較一致，竹葉型

8、半夏和柳葉型半夏出苗晚于芍藥葉型半夏和桃葉型半夏，竹葉、柳葉型半夏的珠芽發(fā)生時間與芍藥葉型半夏的相似。在整個生長過程中，4種葉型半夏均有2～3次倒苗，竹葉和柳葉型半夏的倒苗時間略晚于芍藥葉、桃葉型半夏；另外，4種葉型半夏的佛焰苞發(fā)生率和結(jié)實率均較低。
　?。?）從染色體數(shù)目、SDS-PAGE蛋白電泳、ISSR分子標(biāo)記等方面對4種葉型半夏進(jìn)行了遺傳多樣性分析。結(jié)果表明，4種葉型半夏在染色體數(shù)目、蛋白水平、分子水平上都存在一定的差異，

9、但通過分析發(fā)現(xiàn)，芍藥葉型半夏和桃葉型半夏在蛋白水平、分子水平上的遺傳距離比較接近，有較好的一致性。
　?。?）為研究不同葉型半夏在藥材質(zhì)量上的差異，對不同葉型半夏藥材的外觀性狀、薄層色譜、總生物堿、總酸進(jìn)行了測定，并對其HPLC指紋圖譜進(jìn)行了比較分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同葉型半夏的生物堿含量之間存在一定的差異，竹葉型半夏的總生物堿和總酸含量均較高，其次是芍藥葉型半夏、桃葉型半夏，柳葉型半夏的總生物堿和總酸含量均較低。通過化學(xué)指紋圖譜的相