適碘與低碘條件下硒對自身免疫性甲狀腺疾病的影響.pdf

1、目的：
　　本研究通過建立實驗性自身免疫性甲狀腺炎(experimental autoimmune thyroiditis，EAT)模型，觀察微量元素硒(selenium)在適碘和低碘的情況下對自身免疫性甲狀腺疾病的預(yù)防和治療作用，并探討其機制，為硒用于這類疾病的防治提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1.飼料中碘、硒含量的測定:分別采用砷鈰催化分光光度法和2，3-二氨基萘熒光法進行測定，并檢測精密度和準確度，根據(jù)測定的結(jié)

2、果向飼料中添加適量的亞硒酸鈉進行干預(yù)。
　　2.適碘和低碘條件下硒對自身免疫性甲狀腺炎的影響:以甲狀腺球蛋白和完全弗氏佐劑混合復(fù)制實驗性自身免疫性甲狀腺炎模型。對大鼠的甲狀腺組織進行病理學(xué)檢查，觀察淋巴細胞的浸潤及甲狀腺上皮細胞結(jié)構(gòu)的變化情況，同時，放免法測定甲狀腺自身抗體(TGAb、TMAb)，兩者結(jié)合以判斷造模是否成功。使用試劑盒檢測肝組織抗氧化指標GSH-Px和SOD活性，放免法測定肝組織中的Ⅰ型和Ⅱ型脫碘酶活性，免疫組化法

3、觀察細胞凋亡Fas/FasL的情況。
　　結(jié)果：
　　1.飼料中微量元素碘、硒含量的測定:低硒、低碘和普通飼料中微量元素碘的含量在0～0.90mg/kg之間，硒的含量在0.01～0.30mg/kg之間，其平行樣品測定的相對標準偏差均低于10％，回收率在85～105％的范圍之內(nèi)。
　　2.適碘和低碘條件下硒對自身免疫性甲狀腺炎的影響:
　　(1)甲狀腺組織病理學(xué)檢查:與正常甲狀腺組織相比，模型組(Model)大鼠的

4、甲狀腺組織損傷，包括濾泡上皮的變性壞死和大量淋巴細胞的浸潤。其它各組腺體也都遭到了不同程度的破壞。
　　(2)甲狀腺自身抗體(TG抗體和TM抗體)水平變化:Model組TG抗體和TM抗體比Control組顯著升高(P＜0.05)，其中，TG抗體升高了719％，TM抗體升高了929％。在適碘和低碘條件下各組TG抗體和TM抗體相對于Control組升高明顯（P＜0.05），但相對Model組沒有變化(P＞0.05)。另外，TG抗體和T

5、M抗體呈高度正相關(guān)（P＜0.05）。
　　(3)甲狀腺絕對和相對重量的變化:與正常對照組(Control)相比，模型組(Model)大鼠甲狀腺的絕對和相對重量有所增加（P＜0.05）。低碘條件下的三個硒水平(I-Se++M、I-Se+M、I-Se-+M組)與Control、Model組比較，甲狀腺明顯腫大，絕對和相對重量均增加(P＜0.05)。
　　(4)硒對大鼠抗氧化系統(tǒng)的影響:
　　①大鼠肝組織中的GSH-Px活性

6、的變化:Model組GSH-Px的活性比Control組有所下降，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。在適碘的條件下不同硒水平組（Se++M、Se+M、Se+M組）中，Se++M組的GSH-Px的活性較高（P＜0.05），Se-+M組可見GSH-Px活性明顯降低(P＜0.05);在低碘的條件下三個硒水平(I-Se++M、I-Se+M、I-Se+M組)中，I-Se++M比I-Se+M組GSH-Px活性升高（P＜0.05），I-Se-+M組

7、與前兩組相比明顯降低（P＜0.05）。
　?、赟OD活力的變化:低碘條件下I-Se++M、I-Se+M、I-Se+M三組分別與Control、Model組相比，SOD活性升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其它各組相互比較均未見變化(P＞0.05)。
　　(5)硒對脫碘酶活性的影響:
　　①大鼠肝組織中Ⅰ型脫碘酶的活性的變化:Model組與Control組相比沒有變化(P＞0.05)。在適碘條件下，Se++M組Ⅰ型

8、脫碘酶的活性高于Control組和Model組(P＜0.05)，Se-+M組肝組織脫碘酶活性低于Se++M組和Se+M組（P＜0.05）,Se++M組脫碘酶活性高于Se+M、Se-+M組(P＜0.05);在低碘條件下，雖可見缺硒組比補硒組肝組織脫碘酶活性低，但未見統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　?、诖笫竽X組織中Ⅱ型脫碘酶的活性的變化:Model組與Control組相比Ⅱ型脫碘酶的活性相對降低，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。在

9、適碘條件下三個硒水平（Se++M、Se+M、Se-+M組）腦組織中Ⅱ型脫碘酶的活性，Se-+M組與Se++M、Se+M組相比有降低的趨勢，差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。低碘條件下的三個硒水平(I-Se++M、I-Se+M、I-Se-+M組)中，I-Se-+M組相對于其它兩個組腦組織中Ⅱ型脫碘酶的活性有升高趨勢，差別也沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(6)甲狀腺組織中Fas及其配體FasL的表達:與正常組比較，其它各組染色

10、面積大而且顏色重，表明表達量明顯增多(P＜0.05)。適碘條件下，可見Se++M組表達量比Model組減少。低碘條件下I-Se-+M組Fas蛋白表達量相對其它組增加(P＜0.05);FasL表達量在I-Se-+M組出現(xiàn)顯著增加(P＜0.05)，對組織損傷加重。
　　結(jié)論：
　　1.利用TG和CFA進行EAT模型的復(fù)制，可見大鼠的甲狀腺組織出現(xiàn)炎細胞浸潤和自身抗體明顯升高，為疾病的研究奠定了基礎(chǔ)。
　　2.在適碘條件下，