小膠質(zhì)細胞體外遷移模型的建立及其遷移機制的初步研究.pdf

1、小膠質(zhì)細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system，CNS）網(wǎng)絡(luò)中不可缺少的組成部分，它們是一類高度活躍的細胞，構(gòu)成了CNS的免疫防線。靜息狀態(tài)的小膠質(zhì)細胞不斷的監(jiān)視著周圍的微環(huán)境，并以一定的頻率與神經(jīng)突觸接觸。當大腦的細胞受到損傷時，其釋放出來的某些因子可以誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞快速活化，活化后，它們的突起或胞體會趨向性地向受損區(qū)域遷移，釋放細胞因子和免疫因子，清除細胞碎片或修剪功能異常的神經(jīng)突觸，以維持正常的大腦功能。從

2、受損的神經(jīng)組織中釋放出來的三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）被認為是介導(dǎo)小膠質(zhì)細胞突起趨向性伸展的主要因素。然而，小膠質(zhì)細胞實現(xiàn)遠距離遷移的具體機制還需要深入研究和闡明。
　　為了研究小膠質(zhì)細胞的遷移，借鑒了前人誘導(dǎo)神經(jīng)元軸突轉(zhuǎn)向的方法，發(fā)展并優(yōu)化了體外培養(yǎng)的小膠質(zhì)細胞遷移的研究方法。該方法通過微電極壓力給藥，在短時間內(nèi)形成穩(wěn)定的化學趨化物濃度梯度，可以有效的誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞的遷移。結(jié)合光學顯微成像等

3、技術(shù)，該方法可以實時觀測細胞遷移的整個過程，并可以對細胞遷移過程中的亞細胞結(jié)構(gòu)進行定位和追蹤。該方法簡單易操作、實驗花費少，不僅可以用于研究小膠質(zhì)細胞的細胞遷移，同樣可以用于多種其它細胞（如腫瘤細胞）及其它細胞遷移相關(guān)化學信號的研究。
　　基于該方法，進一步研究了小膠質(zhì)細胞趨向性遷移的分子機制。我們發(fā)現(xiàn)，小膠質(zhì)細胞的溶酶體中富含ATP，在不同的生理病理刺激下，小膠質(zhì)細胞的溶酶體可以通過鈣依賴的胞吐作用釋放ATP。ATP可以誘導(dǎo)小膠