顆粒蛋白前體參與炎癥反應(yīng)信號(hào)傳導(dǎo)通路初探.pdf

1、顆粒蛋白前體是涉及細(xì)胞增殖、炎癥以及具有神經(jīng)保護(hù)功能的蛋白，但是細(xì)胞內(nèi)顆粒蛋白前體的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制，尤其是它在炎癥反應(yīng)中行使功能時(shí)的信號(hào)傳導(dǎo)通路一直沒有被系統(tǒng)的研究過(guò)。 本研究鑒于核因子-kappaB是炎癥與進(jìn)展性腫瘤中的核心組件，在HEK293細(xì)胞中采用瞬時(shí)過(guò)表達(dá)顆粒蛋白前體、瞬時(shí)與穩(wěn)定的通過(guò)RNA干擾來(lái)抑制顆粒蛋白前體、以及采用報(bào)告基因系統(tǒng)共同來(lái)研究顆粒蛋白前體在影響核因子-kappa B活性過(guò)程中所行使的具體功能。同時(shí)我們還

2、在HEK293細(xì)胞中應(yīng)用Super array技術(shù)對(duì)84個(gè)已知與核因子-kappa B活性相關(guān)的基因進(jìn)行了研究，以觀察它們基因表達(dá)水平的差異。結(jié)果顯示HEK293細(xì)胞中本底狀態(tài)能檢測(cè)到顆粒蛋白前體的表達(dá)，過(guò)表達(dá)顆粒蛋白前體不會(huì)增加核因子-kappa B本底狀態(tài)下的活性，也不會(huì)增加核因子-kappa B經(jīng)過(guò)白介素1誘導(dǎo)后的活性，但似乎白介素1能在HEK293細(xì)胞中上調(diào)顆粒蛋白前體的表達(dá)水平。而通過(guò)RNA干擾來(lái)對(duì)內(nèi)源性顆粒蛋白前體進(jìn)行抑制后

3、，則發(fā)現(xiàn)核因子—kappa B活性顯著的降低。當(dāng)然，即便在大部分顆粒蛋白前體都被抑制的前提下，核因子-kappa B仍能對(duì)白介素1的誘導(dǎo)做出活性改變反應(yīng)。Super array的結(jié)果則顯示當(dāng)顆粒蛋白前體被抑制時(shí)，有40多個(gè)基因的表達(dá)出現(xiàn)了顯著改變，其中就有我們很感興趣的基因。上述結(jié)果提示了顆粒蛋白前體在基線水平參與了核因子-kappa B的活性調(diào)節(jié)，但是并沒有參與到外源性白介素1誘導(dǎo)核因子-kappa B活性的通路中。同時(shí)，顆粒蛋白前體