一先天性眼外肌纖維化綜合征家系的分子遺傳學及臨床研究.pdf

1、目的：
　　1.收集一個常染色體顯性遺傳先天性眼外肌纖維化綜合征(Corlgenitalfibrosisoftheextraocularmuscles，CFEOM)家系，分析中國人CFEOM的臨床表型和遺傳特點。并對家系(TT)進行基因連鎖分析定位及候選基因突變檢測，研究致病基因與臨床表型的關系及是否有新的或已知的突變。
　　2.分析CFEOM家系TT患者臨床特征。
　　3.應用MRI技術，對CFEOM家系TT部分患者

2、進行眼球動眼神經(jīng)、外展神經(jīng)相關組織結(jié)構的影像學特征研究，探索發(fā)病機制，為相關的基礎和臨床研究提供影像學證據(jù)。
　　方法：
　　1.對患者及家系成員進行詳細的臨床檢查及遺傳學調(diào)查，繪制遺傳圖，確定遺傳方式。選取分布在第12及16號染色體CFEOM1及CFEOM3區(qū)域的微衛(wèi)星多態(tài)標記：D12S345、D12S59、D12S331、D12S1048用于CFEOM1型的連鎖分析，D16S3063、D16S689、D16S3026、D

3、16S3121用于CFEOM3型的連鎖分析。利用聚合酶鏈反應(PCR)及進行單體型分析；用Linkage軟件的MLINK程序?qū)蚍中徒Y(jié)果進行兩點參數(shù)連鎖分析；用直接測序的方法對家系成員的KIF21A基因的已知突變熱點--第8、20、及21外顯子進行突變檢測，確定突變位點，并比較基因型與表型之間的相關性。
　　2.CFEOM家系TT患者8人，眼科檢查及眼位及眼肌檢查：包括眼位、眼球運動、瞼裂大小、提上瞼肌肌力、被動牽拉試驗及Bel

4、l氏征等。
　　3.采用3.0T核磁對TT家系部分患者腦干行全腦、腦干的MRI薄層掃描。檢測動眼神經(jīng)、外展神經(jīng)支。
　　結(jié)果：
　　1.單體型及連鎖分析發(fā)現(xiàn)：
　　1)TT家系在D12S345和D12S59獲得最大LOD值2.71(重組率θ=0，外顯率=100％)，可以肯定此家系在D12S345及D12S59緊密連鎖。
　　2)在16號染色體上的4個標記，LOD值均小于1，不存在連鎖。
　　2.在家系

5、中測出KIF21A基因第21外顯子的1個雜合突變：所有患者中均發(fā)現(xiàn)有2860C>T(R954W)的錯義突變，即在2860堿基的位置C變成T，這個突變對應于蛋白質(zhì)的莖部區(qū)域，導致第954氨基酸位置的第1個核苷酸的改變，使一個高度保守的精氨酸被谷氨酞胺替換。
　　3.CFEOM家系TT屬常染色體顯性遺傳，臨床特征符合CFEOM1型，但有部分患者表現(xiàn)出遺傳異質(zhì)性，存在與CFEOM3交叉的臨床特征，表現(xiàn)為單眼上瞼下垂(Ⅱ：9)或原在位眼位

6、正位(Ⅱ：7、Ⅲ：3)。
　　4.MRI薄層掃描顯示TT家系中Ⅱ：5、Ⅱ：9及Ⅲ：5的眼動神經(jīng)核團均顯示發(fā)育不良，Ⅱ：5及Ⅲ：5患者表現(xiàn)動眼神經(jīng)變細，右側(cè)外展神經(jīng)缺如。
　　結(jié)論：
　　1.TT家系的遺傳方式為常染色體顯性遺傳，確定為CFEOM1型。
　　2.連鎖分析將致病基因定位于12號染色體CFEOM1位點，在微衛(wèi)星多態(tài)性標記D12s345和D12s59取得最大LOD值2.71。
　　3.測序發(fā)現(xiàn)TT家

7、系突變位點位于KIF21A基因第21外顯子2860C>T(R954W)，100名正常人無此突變。因此，KIF21A基因為該CFEOM1家系患者的致病基因。
　　4.家系TT證明了CFEOM1型可以有更多的表現(xiàn)型，這個家系被記錄到和CFEOM3交叉的表現(xiàn)型，即臨床表型的異質(zhì)性。
　　5.腦干MRI薄層掃描結(jié)果進一步證實了該家系的病變與顱內(nèi)腦干神經(jīng)核團與眼動神經(jīng)發(fā)育異常有關。MRI檢查有助于CFEOM的臨床診斷和治療及更好的理解