凍存骨髓基質(zhì)細(xì)胞在誘導(dǎo)條件下成骨潛能的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、篁1108813分類號(hào)：7811學(xué)校代碼：10392福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文凍存骨髓基質(zhì)細(xì)胞在誘導(dǎo)條件下成骨潛能的實(shí)驗(yàn)研究StudyOnosteogenicpotentialofcryopreservedbonemalTOWstromalcellsinvitroandinvivo接收院(系)：福建醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院申請(qǐng)人：袁芳學(xué)科(專業(yè))：口腔臨床醫(yī)學(xué)導(dǎo)師：閏福華教授研究起止日期：2004年10月至2007年5月：oo七年五月凍存骨髓基

2、質(zhì)細(xì)胞在誘導(dǎo)條件下成骨潛能的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要目的：骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bonemarrowstromalcells，BMSCs)作為間充質(zhì)細(xì)胞，具有多向分化潛能，是一種理想的骨組織工程的種子細(xì)胞，有著廣泛的應(yīng)用前景隨著細(xì)胞生物學(xué)及組織工程學(xué)研究的深入和發(fā)展，對(duì)BMSCs的需求量越來越大，故對(duì)其進(jìn)行長期、大量的保存十分必要。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)凍存一年后Beagle犬BMSCs進(jìn)行復(fù)蘇，傳代擴(kuò)增與誘導(dǎo)分化，探討凍存后BMSCs在體外的成骨潛能，同時(shí)，建

3、立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，探討凍存BMSCs與膠原膜構(gòu)建細(xì)胞和支架材料復(fù)合體在裸鼠體內(nèi)的成骨能力，為進(jìn)一步研究BMSCs修復(fù)頜骨缺損、牙周組織缺損的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法：本研究分為體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)兩個(gè)部分：第一部分凍存骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外成骨潛能的實(shí)驗(yàn)研究：選取于液氮中凍存11個(gè)月后的成年Beagle犬陰sCs復(fù)蘇后進(jìn)行體外擴(kuò)增培養(yǎng)，并在實(shí)驗(yàn)組傳代培養(yǎng)中加入101∞l／L地塞米松、50mg／L維生素C和lOmlol／LB一甘油磷酸鈉進(jìn)

4、行誘導(dǎo)分化，對(duì)照組未加礦化誘導(dǎo)液，對(duì)比觀察細(xì)胞生長形態(tài)、細(xì)胞誘導(dǎo)前后增殖情況、細(xì)胞堿性磷酸酶(alkalinephosphatase，ALP)含量以及形成礦化結(jié)節(jié)能力的改變。第二部分凍存骨髓基質(zhì)細(xì)胞和膠原膜復(fù)合材料在裸鼠體內(nèi)的成骨潛能研究：體外分離培養(yǎng)Beagle犬蹦sCs，凍存二代生長狀況良好的BMSCs。12個(gè)月后，復(fù)蘇凍存的酬scs，并在體外構(gòu)建BMSCs和0505cm2大小的BME—IOX復(fù)合體將膠原膜BMSCs礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)液、