前列腺癌組織中TMPRSS2基因與ETS家族基因的多種融合亞型及意義.pdf

1、目的： 了解前列腺癌患者組織中TMPRSS2基因與ETS家族基因ERG、ETV1、ETV4之間的融合情況及意義。 方法： 1、根據(jù)Genbank中的TMPRSS2(NM_005656.2)、ERG(NM_004449.3)、ETV1(NM_004956.3)、ETV4(NM_001986.2)序列，在TMPRSS2基因上設(shè)計(jì)上游內(nèi)、外引物各一條，并分別在ERG、ETV1、ETV4等每個(gè)基因上設(shè)計(jì)下游內(nèi)、外引物各一

2、條，運(yùn)用巢式RT-PCR對(duì)前列腺癌患者組織及良性增生組織的TMPRSS2基因與ERG、ETV1、ETV4基因之間融合所產(chǎn)生的TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1、TMPRSS2/ETV4融合體進(jìn)行檢測(cè)。 2、巢式RT-PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5％瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果陽(yáng)性者，純化PCR產(chǎn)物進(jìn)行直接測(cè)序；用BLAST在線工具軟件對(duì)測(cè)序結(jié)果與參考序列進(jìn)行比對(duì)并確定融合位點(diǎn)。 3、分析融合基因與前列腺癌組織Gleason分級(jí)

3、關(guān)系。 4、本研究的臨床病例包括前列腺癌(PCa)組32例，年齡60～94歲，平均74±7.6歲。Gleason評(píng)分5～7分15例，8～10分17例。前列腺良性增生(BPH)組34例，年齡51～83歲，平均69±7.9歲。前列腺組織在直腸超聲波(TRUS)引導(dǎo)下6點(diǎn)穿刺。標(biāo)本分兩份，一份送組織病理學(xué)檢查，另一份取組織立即放入液氮中保存。臨床診斷均經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)。 結(jié)果： 1、前列腺癌患者組織標(biāo)本中檢測(cè)到TMPR

4、SS2基因與ERG、ETV1基因之間融合所產(chǎn)生的TMPRSS2/ERG和TMPRSS2/ETV1融合基因，陽(yáng)性率分別為53.1％(17/32例)和6.3％(2/32例)，未檢到TMPRSS2/ETV4融合基因，34例前列腺良性增生組織標(biāo)本中均未檢到TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1和TMPRSS2/ETV4融合基因。 2、發(fā)現(xiàn)TMPRSS2/ERG融合基因存在至少5種不同亞型，其中1種為新發(fā)現(xiàn)融合基因亞型(Genb

5、ank登錄號(hào)：EU090248)；TMPRSS2/ETV1融合基因?yàn)?種融合型，為新發(fā)現(xiàn)融合基因亞型(Genbank登錄號(hào)：EU090249)；同一標(biāo)本只能檢出TMPRSS2/ERG融合基因或TMPRSS2/ETV1融合基因陽(yáng)性，但單一標(biāo)本中可存在到多種TMPRSS2/ERG融合基因亞型。 3、融合基因陰性組與陽(yáng)性組Gleason評(píng)分無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.187)。 結(jié)論： 前列腺癌組織中存在存在TMPRSS2/