結(jié)腸癌組織中Raf-1的表達(dá)與腫瘤血管生成的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　1.了解raf-1在人結(jié)腸癌組織中的表達(dá)與腫瘤血管生成的關(guān)系，并探討其臨床意義。
　　2.建立結(jié)腸癌裸鼠移植瘤模型，觀察Raf-1在其中的表達(dá)，探討Raf-1與腫瘤血管生成的關(guān)系。
　　方法：
　　收集第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院病理科2005－2007年經(jīng)病理學(xué)診斷確診的87例結(jié)腸癌標(biāo)本，以及相應(yīng)的距腫瘤1cm區(qū)域的癌旁區(qū)組織標(biāo)本和距腫瘤5cm區(qū)域的切緣區(qū)組織標(biāo)本。87例患者中男性55例，女性32例，年齡3

2、1～75歲，平均年齡為（65±0.8）歲。參照臨床及病理資料，分別依據(jù)腫瘤大小、轉(zhuǎn)移情況、及分化程度將病例分組。所有組織標(biāo)本均用10％甲醛固定，石蠟包埋。
　　采用免疫組化法檢測(cè)87例結(jié)腸癌病例癌區(qū)、癌旁區(qū)及切緣區(qū)組織標(biāo)本中Raf-1的表達(dá)，應(yīng)用CD34標(biāo)記的免疫組化法檢測(cè)微血管密度（microvessel density,MVD）；分析Raf-1表達(dá)和MVD與結(jié)腸癌體積、轉(zhuǎn)移、分化等病理特征之間的相關(guān)性。
　　通過West

3、ern blot方法檢測(cè)不同結(jié)腸癌細(xì)胞系（HT-29、SW480、LS174T）中Raf-1的表達(dá)，然后將表達(dá)差異較大的2株細(xì)胞（HT-29、LS174T）分別接種到BALB/cnu/nu小鼠體內(nèi)，分別觀察腫瘤的生長(zhǎng)速度、瘤重變化等情況，最后通過免疫組化的方法分別檢測(cè)瘤組織中Raf-1的表達(dá)及腫瘤微血管密度（MVD）的情況，分析二者的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1.Raf-1在癌組織、癌旁組織、切緣區(qū)組織的陽性率分別為86.4

4、7％，37.34％，11.03％，三者之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01）。
　　2.癌組織、癌旁組織、切緣區(qū)組織中MVD值分別為：（61.35±11.6）、（28.34±6.7）、（8.26±3.7），三者之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01）。
　　3.Western blot檢測(cè)HT-29、SW480、LS174T中Raf-1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)LS174T中Raf-1的表達(dá)量最高，而HT-29表達(dá)量最低。因此，選擇LS17

5、4T和HT-29接種至裸鼠。
　　4.在裸鼠移植瘤模型中，LS174T組移植瘤生長(zhǎng)速度及瘤重大于HT-29組。
　　5.免疫組化結(jié)果顯示：Raf-1在LS174T組中的強(qiáng)陽性率為50％，在HT-29組中為10％，兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　6.在LS174T組中MVD平均值為28.32±5.2，HT-29組MVD平均值為19.23±4.7，兩組之間MVD值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。