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文檔簡介
1、背景與目的:
DNA錯配修復(mismatch repair,MMR)基因在維持基因組穩(wěn)定性中起關(guān)鍵作用。大部分的遺傳性結(jié)直腸癌由MMR基因種系突變引起,即遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer,HNPCC)。另外有10-15%的散發(fā)性結(jié)直腸癌是由錯配修復基因hMLH1表遺傳學失活所致。MMR功能障礙導致的結(jié)直腸癌表現(xiàn)為微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(microsate
2、lliteinstability,MSI)。既往研究表明,在HNPCC家族中,男性突變攜帶者患結(jié)直腸癌的風險高于女性突變攜帶者;在中國人HNPCC家系中也發(fā)現(xiàn)了類似情況。這種HNPCC發(fā)病率上的性別差異可能與雌激素有關(guān)。有研究報道絕經(jīng)后雌激素替代治療能降低MSI陽性結(jié)腸癌風險,因此推測雌激素可以預防MMR功能缺陷引起的結(jié)直腸癌。事實上,近年來大量臨床研究已證實,雌激素對結(jié)直腸癌可能有預防作用,但是其機制仍不明確。根據(jù)以上臨床現(xiàn)象,可以假
3、設(shè):雌激素可能通過影響結(jié)直腸細胞的MMR基因表達和功能來預防結(jié)直腸癌的發(fā)生。但迄今尚無研究雌激素對結(jié)腸上皮細胞MMR基因表達影響的報道。因此本實驗研究了正常人血清雌激素水平與結(jié)腸上皮細胞中兩種代表性的MMR基因(hMLH1、hMSH2)表達水平的關(guān)系,為這一假說提供證據(jù)。
材料與方法
共選取結(jié)腸鏡檢查正常的健康人42例。于結(jié)腸鏡檢查前半小時抽血測定其血清雌二醇(estradiol,E2)水平。結(jié)腸鏡下于右半結(jié)
4、腸取肉眼觀正常的結(jié)腸粘膜組織,用于提取總RNA進行半定量RT-PCR,及經(jīng)甲醛固定、石蠟包埋后用于免疫組化染色,分別評定hMLH1、hMSH2基因的mRNA相對表達量和蛋白免疫組化染色陽性指數(shù)(positivity index,PI)。然后分析血清E2水平與結(jié)腸粘膜hMLH1和hMSH2表達量的關(guān)系。
結(jié)果
正常人血清E2水平與結(jié)腸上皮細胞hMLH1基因的表達量之間存在雙峰曲線關(guān)系,三次方程模型為描述這一關(guān)系
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