改性殼聚糖聯(lián)合甲基潑尼松龍對大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復的相關研究.pdf

1、目的:
　　研究表明改性殼聚糖是一種天然聚陽離子生物多糖，具有優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性，已廣泛應用于腹腔術后的防粘連治療，也在神經(jīng)修復、皮膚修復、骨及軟骨修復等方面表現(xiàn)出廣泛的應用前景。甲基潑尼松龍是一種中效糖皮質激素，具有抗炎、免疫抑制以及改善損傷神經(jīng)附近微環(huán)境的作用，有研究證實在周圍神經(jīng)損傷后應用甲基潑尼松龍可促進神經(jīng)再生。本實驗通過聯(lián)合應用改性殼聚糖與甲基潑尼松龍，觀察對SD大鼠坐骨神經(jīng)離斷吻合術后神經(jīng)再生修復所起的作

2、用，探索有效、安全的改善周圍神經(jīng)損傷再生與修復的新方法。
　　方法:
　　6周齡SD(Sprague-Dawley)大鼠60只，雌雄不限，質量160-200 g，隨機分為5組，每組12只:A改性殼聚糖組，B甲基潑尼松龍組，C改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合治療組，D生理鹽水對照組，E假手術組。ABCD四組SD大鼠于坐骨結節(jié)與股骨大轉子連線和坐骨神經(jīng)相交處用手術刀片切斷坐骨神經(jīng)，并在手術顯微鏡下，將切斷的坐骨神經(jīng)用9-0帶線縫合針

3、行神經(jīng)外膜端端縫合，神經(jīng)外膜縫合4-6針。顯微吻合后立即根據(jù)分組不同于神經(jīng)吻合口周圍注入不同藥物進行干預（A組改性殼聚糖1ml;B組甲基潑尼松龍10mg;C組改性殼聚糖1ml+甲基潑尼松龍10mg;D組生理鹽水1ml），E組假手術組游離坐骨神經(jīng)后不切斷。術后每組大鼠縫合切口，肌注慶大霉素，預防感染。術后每天觀察SD大鼠展爪反射恢復、右下肢腫脹、皮膚潰瘍、足趾脫落等一般情況，并于術后4，8，12周測定坐骨神經(jīng)傳導速度、腓腸肌濕質量殘存率、

4、腓腸肌細胞直徑及截面積，坐骨神經(jīng)粘連，光鏡及透射電鏡觀察坐骨神經(jīng)組織學變化。
　　結果:
　　實驗SD大鼠60只，實驗過程中無大鼠意外死亡及術后感染發(fā)生，實驗過程中無數(shù)據(jù)脫失。所有大鼠術后8天右側股后部皮膚傷口全部愈合。ABCD四組坐骨神經(jīng)切斷并吻合大鼠，術后麻醉復蘇后即出現(xiàn)右下肢癱瘓癥狀，并逐漸出現(xiàn)右下肢失神經(jīng)性皮膚營養(yǎng)不良表現(xiàn)。A組第25天開始展爪反射恢復，第32天全部恢復。B組第25天開始恢復，第33天全部恢復。C組于

5、第22天出現(xiàn)恢復，第28大全部恢復。D組第26天開始恢復，第38天全部恢復。E組術后展爪反射未消失。結果顯示C組較A組B組早，具有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），A組與B組相比，展爪反射恢復時間類似，相比無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。術后第4周、8周、12周，在體測量坐骨神經(jīng)傳導速度:在3個時間節(jié)點中，E組坐骨神經(jīng)傳導速度最快，ABCD四組明顯慢于E組。D組生理鹽水對照組坐骨神經(jīng)傳導速度最慢。C組坐骨神經(jīng)傳導速度快于A組與B組及D組，具有統(tǒng)

6、計學差異(P＜0.05)。A組坐骨神經(jīng)傳導速度稍稍快于B組，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。術后第4周、8周、12周，測定腓腸肌濕質量殘存率表明:隨著術后時間延長，ABCD四組大鼠腓腸肌濕質量殘存率逐漸下降，其中D組下降最快。E組濕質量殘存率明顯高于ABCD四組，比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。C組與ABD組相比，濕質量殘存率下降明顯較慢，具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。術后第4周、8周、12周，測量腓腸肌直徑及計算截面積顯示:隨著

7、術后時間延長，ABCD四組腓腸肌肌細胞直徑及截面積進行性減小;與E組相比較，D組直徑及截面積減小最多（P＜0.05），在同一時間節(jié)點上，A組、B組及C組腓腸肌肌細胞直徑及截面積減小較少。C組與ABD三組相比，直徑及截面積減小明顯較小，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。術后第4周、8周、12周，觀察坐骨神經(jīng)粘連情況表明:D組坐骨神經(jīng)與周圍組織粘連較重，不易分離。E組亦存在較重粘連。A組、B組及C組粘連情況較D組及E組為輕。在ABC三組中

8、，C組粘連情況相對較輕，相比具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。術后12周時電鏡觀察:E組假手術組可見神經(jīng)纖維無明顯分散，排列有序，髓鞘境界清晰，未見明顯髓鞘脫失。D組生理鹽水對照組可見神經(jīng)纖維、樹突、軸突及細胞器均嚴重變性及壞死，膜結構不清，多見空泡狀改變，髓鞘排列雜亂、相互融合、溶解，髓鞘完整性嚴重破壞。C組改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合治療組可見神經(jīng)纖維束及樹突、軸突、胞體等結構，細胞膜及細胞器均較清楚，纖維排列稍紊亂，胞體內(nèi)膜結構及形

9、態(tài)較正常稍差，部分胞體輕度水腫及變性。A組改性殼聚糖組可見神經(jīng)纖維排列尚有序，未見明顯變性，部分細胞器變性，部分膜結構不清，欠光滑，細胞器變性變形，可見空泡變，部分染色質凝集固縮，但優(yōu)于E組假手術組及D組生理鹽水對照組。B組甲基潑尼松龍組鏡下所見類似于改性殼聚糖組。
　　結論:
　　1.改性殼聚糖、甲基潑尼松龍均能防治周圍神經(jīng)損傷后吻合口附近粘連和瘢痕增生。改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合使用后，明顯減少粘連和瘢痕發(fā)生率。