甲狀腺微小乳頭狀癌與BRAFV600E突變及蛋白表達(dá)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：近年來甲狀腺癌的發(fā)病率在我國(guó)有明顯升高的趨勢(shì)，尤其是微小乳頭狀癌。BRAFV600E突變是甲狀腺癌最常見的分子遺傳學(xué)改變。本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)PTMC中BRAFV600E突變，同時(shí)采用新的特異性VE1抗體運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)PTMC中BRAF突變蛋白，旨在了解PTMC BRAFV600E突變及VE1抗體的表達(dá)狀態(tài)，BRAFV600E突變及VE1抗體的表達(dá)與PTMC臨床病理參數(shù)間的關(guān)系，以期為病人的診斷、鑒別診斷及預(yù)后

2、判斷提供重要依據(jù)。
　　方法：收集了2010年-2015年南京軍區(qū)福州總院病理科和解放軍第175醫(yī)院病理科診斷為 PTMC的石蠟包埋組織100例，同時(shí)收集診斷為 PTC（病灶＞1.0cm）50例、甲狀腺瘤20例及10例癌旁正常甲狀腺組織的石蠟包埋組織作為對(duì)照。上述標(biāo)本均經(jīng)2位高年資病理醫(yī)師進(jìn)行組織學(xué)觀察并確診。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)PTMC中BRAFV600E突變，同時(shí)采用新的特異性VE1抗體運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)PTMC中B

3、RAF突變蛋白。比較PTMC與PTC中BRAFV600E突變情況，了解BRAFV600E突變和特異性VE1抗體表達(dá)與各自臨床病理參數(shù)間的關(guān)系，及其BRAFV600E突變及VE1抗體表達(dá)的相關(guān)性。
　　結(jié)果：①100例PTMC中檢測(cè)到BRAFV600E突變者54例（54.0％）。50例PTC中檢測(cè)到BRAFV600E突變者37例（74.0%）。20例甲狀腺腺瘤和10例正常甲狀腺組織均未檢測(cè)到突變。綜合100例PTMC和50例PTC的

4、數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)BRAFV600E突變與腫瘤大小有關(guān)，與年齡、性別、病灶單發(fā)或多發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腺組織浸潤(rùn)、伴隨疾病、復(fù)發(fā)等無關(guān)。②74例 PTMC檢測(cè) BRAF突變蛋白，陽性表達(dá)者37例（50.0%）。20例甲狀腺腺瘤和10例正常甲狀腺組織BRAF突變蛋白皆陰性表達(dá)。BRAF突變蛋白表達(dá)與腫瘤大小有關(guān)，與年齡、性別、病灶單發(fā)或多發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腺組織浸潤(rùn)、伴隨疾病、復(fù)發(fā)等無關(guān)。③實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法和免疫組化法的吻合率78.38%（K=0

5、.568，P=0.000）。將實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法的結(jié)果作為“金標(biāo)準(zhǔn)”進(jìn)行對(duì)比，VE1 IHC結(jié)果7例假陽性和9例假陰性，VE1 IHC敏感性為76.9%，特異性為80.0%。
　　結(jié)論：約有一半以上的PTMC病例存在BRAFV600E基因突變，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR法是檢測(cè) BRAFV600E基因突變的有效方法。與實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法比較，采用特異性VE1抗體運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)PTMC中BRAF蛋白是可行的。兩種方法都可以有效