肺癌組織NF-κBP65和HSP70的表達(dá)及其關(guān)系的研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文肺癌組織NFκBP65和HSP70的表達(dá)姓名：夏向群申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師：吳逸明2003.6.6鄭州人學(xué)2003年顧一l論文肺癌組織NFKBP65和HSP70的表達(dá)及其關(guān)系的研究織和配對的正常組織中的NFrJ3P65和HSP70蛋白的表達(dá)情況進行了研究，并對二者在肺癌不同病理分型和臨床分期的表達(dá)情況以及二者之間的關(guān)系作了初步的分析。方法：1標(biāo)本收集：本研究共收集肺癌組織(C組)和配對的

2、正常組織(N組)各43例。其中有鱗癌18例，腺癌16例，腺鱗癌5例，大細(xì)胞肺癌1例，小細(xì)胞肺癌3例。收集的新鮮標(biāo)本立即放入液氮中，后轉(zhuǎn)入一80。C冰箱保存。2標(biāo)本組織蛋白的提?。嚎焖偌羧∵m量標(biāo)本，0。CPBS充分洗滌，在冰預(yù)冷的懸浮緩沖液中勻漿后盡快加入等體積的2SDS凝膠加樣緩沖液，然后將樣品置于沸水浴中加熱10min，超聲斷裂DNA，在室溫下10，000rpm將樣品離心10min，上清液轉(zhuǎn)移于另一Eppendorf管中，棄去沉淀物。

3、所得上清液即為蛋白質(zhì)提取物，一20。C保存。用紫外可見分光光度儀檢測上清液中蛋白質(zhì)提取物的OD值，計算使用Westernblot免疫印跡法檢測靶蛋白所需要的樣品量。3SDS—PAGE分離蛋白：應(yīng)用12％的十二烷基磺酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDSP：AGE)將組織蛋白進行分離。4Westernblot：將凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，轉(zhuǎn)移上蛋白的硝酸纖維素膜經(jīng)封閉液封閉后，分別與一抗、二抗雜交，最后用3，3’二氨基聯(lián)苯胺(DAB)進

4、行顯色。5照相：應(yīng)用BioImagingSystem照相，并用GeneTools軟件分析各蛋白條帶，將結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)值資料，保存。6統(tǒng)計學(xué)處理：所獲資料采用統(tǒng)計分析系統(tǒng)SPSSl00軟件處理。結(jié)果：1肺癌組織中NF—rBP65蛋白表達(dá)結(jié)果：C—N配對中有744％(32／43)的癌組織NFrBP65蛋白表達(dá)增高。NF—rd3P65在癌組織與正常組織的表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO05)。NFrd3P65在肺癌I、II、III臨床分期中的表達(dá)增高