60Coγ射線對線粒體基因COXⅠ、ATPase6表達水平的影響.pdf

1、目前，隨著核技術(shù)在科技、醫(yī)療等領(lǐng)域的飛速發(fā)展與應(yīng)用，輻射對人類環(huán)境及健康的影響越來越受關(guān)注。突發(fā)放射性事故而又沒有佩戴物理劑量計時，生物劑量計對于受照人員的劑量估算具有重要作用。染色體畸變分析一直是國際公認的輻射生物劑量估算的金標準，然而其細胞培養(yǎng)周期較長，對工作人員的經(jīng)驗水平要求較高。因此，尋找一種便捷、快速的生物劑量計始終是輻射生物劑量估算領(lǐng)域的研究熱點。線粒體DN A是人體內(nèi)僅有的核外DN A，具有高拷貝數(shù)。因為缺少組蛋白和非組蛋

2、白的保護，與核DN A相比，線粒體 DN A對氧化損傷更敏感，更容易發(fā)生突變，而且線粒體DN A缺乏有效的修復(fù)系統(tǒng)，因此更容易受到電離輻射的影響。本研究利用分子生物學(xué)手段來研究電離輻射對線粒體基因表達水平的變化，以期獲得一種新型輻射標志物，為新型輻射生物劑量計的研究奠定基礎(chǔ)。
　　目的：
　　研究線粒體基因受照后的表達變化規(guī)律，以求在線粒體內(nèi)尋找一種新型輻射損傷標志物，為新型輻射生物劑量計的研究奠定基礎(chǔ)。
　　方法：<

3、br>　　1、用不同劑量水平(0~5 Gy)的60Coγ射線照射正常人離體外周血樣本，于照射后2 h，研究線粒體基因ND1、ND6、COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ、ATPase6和ATPase8在轉(zhuǎn)錄水平的表達變化，以求篩選出輻射敏感基因。
　　2、用不同劑量水平(0~3 Gy)的60Coγ射線照射人淋巴細胞株樣本，于照射后12 h、24 h、48 h、72 h，研究篩選出的線粒體基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達變化，并研究其時效關(guān)系。

4、　　3、采用不同劑量水平（0-5 Gy）60Coγ射線照射正常人離體外周血，于照射后6h后，用流式細胞儀檢測篩選出的線粒體基因的蛋白質(zhì)表達水平變化。
　　結(jié)果：
　　1、COXⅠ、ATPase6兩個基因的表達變化在0-3 Gy范圍內(nèi)隨受照劑量的增加呈持續(xù)上升趨勢，呈現(xiàn)出較好的劑量響應(yīng)關(guān)系。N D6隨著受照劑量的增加呈下降趨勢。其他4個基因的表達水平基本都是在0-3 Gy范圍內(nèi)先略微下降后持續(xù)上升，3 Gy照射后表達水平最高。

5、
　　2、量效關(guān)系方面，在60Coγ射線照射人淋巴細胞株后12 h、48 h、72 h C OXⅠ基因mRNA表達水平都呈上升趨勢，具有良好的劑量響應(yīng)關(guān)系。而照射后24 h COXⅠ基因mRN A表達水平先下降后上升。ATPase6基因的表達只有在0-0.8 Gy照射后12 h具有規(guī)律性，表達水平隨受照劑量的增加而上升，具有良好的劑量響應(yīng)關(guān)系。在時效關(guān)系方面，當受照劑量為3 Gy時，隨著照射后培養(yǎng)時間的延長，COXⅠ基因表達水平呈

6、明顯上升趨勢，時效關(guān)系非常顯著。而 ATPase6基因表達水平隨著照后時間的延長不具有明顯的時間響應(yīng)關(guān)系。
　　3、0-5 Gy60Coγ射線照射人外周血淋巴細胞后，COXⅠ蛋白各劑量組與對照組相比，只有1 Gy照射后，蛋白質(zhì)表達水平有顯著性提升。
　　結(jié)論：
　　1、受照后2 h，在轉(zhuǎn)錄水平，COXⅠ和ATPase6兩個基因在0-3 Gy劑量范圍內(nèi)呈上升趨勢，呈現(xiàn)出較好的劑量響應(yīng)關(guān)系，可以用于進一步研究。